[发明专利]一种用于2019-nCov多重扩增反应试剂的冻干保护剂及其应用

权利要求书

1.一种用于2019-nCov多重扩增反应试剂的冻干保护剂，包括以下组分：

海藻糖1-20％、甘露醇4-20％、普鲁兰多糖0.1-4％、牛血清白蛋白0.0001-1％、表面活性剂0.01-0.5％、消泡剂0.01-0.1％、水杨酸钠0.1-1％、硫酸软骨素0.5-5％、云芝多糖0.1-2％、透明质酸1-5％；硫酸软骨素和普鲁兰多糖的质量比为1-5:1；所述云芝多糖和普鲁兰多糖的质量比为1-3:1。

2.如权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，包括以下组分：

海藻糖3-12％、甘露醇8-12％、普鲁兰多糖0.25-1％、牛血清白蛋白0.04-0.16％、表面活性剂0.01-0.03％、消泡剂0.01-0.05％、水杨酸钠0.1-0.5％、硫酸软骨素0.5-3％、云芝多糖0.5-2％、透明质酸1-3％。

3.如权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，所述冻干保护剂，包括以下组分：海藻糖3％、甘露醇9％、普鲁兰多糖0.25％、牛血清白蛋白0.04％、表面活性剂0.03％、消泡剂0.01％、水杨酸钠0.25％、硫酸软骨素0.75％、云芝多糖0.5％、透明质酸2％。

4.如权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，所述硫酸软骨素和普鲁兰多糖的质量比为3:1；所述云芝多糖和普鲁兰多糖的质量比为2:1。

5.如权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，所述的表面活性剂为Tween20、Tween80、Span-20、Span-40、Span-60和Span-80中的一种或几种。

6.如权利要求5所述的冻干保护剂，其特征在于，所述的表面活性剂为Tween20和Span-60的混合物。

7.如权利要求1-6任一所述冻干保护剂在制备2019-nCov多重扩增反应试剂冻干片中的应用。

8.一种包含权利要求1-6任一所述冻干保护剂的2019-nCov多重扩增反应试剂冻干片，其特征在于，所述冻干片包括：冻干保护剂、缓冲液、酶和扩增反应试剂；其中，所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷溶液或4-羟乙基哌嗪乙磺酸溶液；所述酶为核糖核酸酶抑制剂和DNA聚合酶、反转录酶的酶混合液；

所述扩增反应试剂包括引物、探针、三磷酸脱氧核苷酸；

所述引物包括正向引物和反向引物。

9.如权利要求8所述的2019-nCov多重扩增反应试剂冻干片的制备方法，包括以下步骤：

(1)取配方量的海藻糖、甘露醇、普鲁兰多糖、牛血清白蛋白、表面活性剂、消泡剂、水杨酸钠、硫酸软骨素、云芝多糖、透明质酸混合均匀，制成冻干保护剂；

(2)将引物、探针、三磷酸脱氧核苷酸混合均匀，制成扩增反应试剂；

(3)将冻干保护剂与扩增反应试剂混合均匀后加入缓冲液和酶混合液，制成冻干试剂；

(4)将冻干试剂加入至模具中，将模具转移至冷冻干燥机中冷冻干燥，制得冻干片产品。

10.如权利要求9所述2019-nCov多重扩增反应试剂冻干片的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述冷冻干燥机的冻干程序为：

S1：将温度降至-50℃，恒温1-3h；

S2：将温度降低至-40--30℃，压强为80-120pa；保持0.5-1h；

S3：将温度按照0.25-1℃/min的速率升温至5℃进行干燥；

S4：继续升温至10-20℃，保持1.5-3h，完成冷冻干燥处理过程。

11.如权利要求8所述2019-nCov多重扩增反应试剂冻干片或权利要求9-10任一所述2019-nCov多重扩增反应试剂冻干片的制备方法制备的冻干片在制备微流控芯片中的应用。