[发明专利]一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条、检测卡及试剂盒

说明书

本发明提供了一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条，包括硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上包被有相互分离且依次分布的封闭线、抗环瓜氨酸肽抗原检测线、羊抗鼠IgG质控线，所述封闭线上固相有荧光抗体线，所述封闭线和荧光抗体线的喷涂方式如下：将配置好的封闭液喷涂于硝酸纤维素膜上封闭线对应的位置，干燥0.5h，制得封闭线，将荧光抗体用稀释液稀释，混匀之后，喷涂于干燥之后的封闭线正中间位置，制得荧光抗体线。解决了荧光抗体包被于硝酸纤维素膜上长时间存放难以释放的难题，降低了生产成本，同时解决了湿式免疫荧光层析法荧光抗体不能常规存放的难题，提高了荧光抗体的稳定性，有利于试剂盒的运输与储存，延长了试剂盒的保质期。

技术领域

本发明涉及生物学技术领域，具体涉及一种针对抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条、检测卡及试剂盒。

背景技术

类风湿关节炎（RA）是一种最常见的自身免疫性疾病，也是最多发的慢性炎症关节疾病，在全世界大约有1%的人患有此病，大约75%是女性患者。病理表现为关节滑膜的慢性炎症、血管翳形成，并出现关节的软骨和骨破坏，若不能及时诊断及时正规治疗，最终可导致关节畸形和功能丧失。RA早期、可靠的诊断对于采取适当的治疗控制病情发展、避免不可逆的关节损坏是十分重要的。

RA患病早期表现多样化，对疑似RA患者最常用的血清学检测除了常规炎症参数外，就是类风湿因子（RF）。RF是抗γ球蛋白抗体（主要是IgM抗体），在RA中的阳性率为60～80%。由于在健康人群和各种感染性疾病以及其它自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮、干燥综合征和硬皮病等）患者中也可以检出RF，特异性差，不利于早期诊断。

近年来发现，抗环瓜氨酸肽抗体（抗环瓜氨酸肽）是环状聚丝蛋白的多肽片段，其对RA是有很好的敏感度和特异性，在RA的早期阶段就可出现阳性，具有很高的阳性预测值，同时可以用来预测RA的严重程度。

研究表明，在RA 患者的血清中可以检测到抗核周因子(APF)和抗角蛋白抗体(AKA)，其抗原位点是环瓜氨酸多肽，抗环瓜氨酸肽抗体（抗环瓜氨酸肽）主要是IgG类抗体，对RA的特异性为95%，70～80%患者在疾病很早期就在血清和滑膜液中出现抗环瓜氨酸肽抗体（抗环瓜氨酸肽），因此，抗环瓜氨酸肽抗体（抗环瓜氨酸肽）的检测对RA早期诊断以及预后具有重要意义。

目前，检测抗环瓜氨酸肽抗体（抗环瓜氨酸肽）的方法有很多，酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金免疫层析法、免疫比浊法、化学发光法、放射免疫法等方法进行测定，但缺乏更为快速简易而又可靠的检测方法。酶联免疫法法自动化程度不高，检测时间长，且受人为因素影响较大；胶体金免疫层析法操作简便，但判读结果存在人为误差，只能定性检测；免疫比浊法受样本内容物的影响，结果区分度差、漏检率较高；放射免疫法存在着环境污染问题；而化学发光法灵敏度虽高，但测定线性范围较小且检测成本较高，需要特定化学发光检测仪，这些原因导致其应用范围较小。

荧光免疫层析法检测血清中的抗环瓜氨酸肽抗体（抗环瓜氨酸肽），与其他几种方法相比较，存在操作简单、时间短、灵敏度高、线性范围宽、无污染、仪器自动显示结果，定量检测等显著的特点，因此，荧光免疫层析法有着极大的研究价值。目前，荧光免疫层析法多为液相反应模式，试剂盒需要2～8℃放置，对试剂盒的储存及运输带来不便。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对以上不足，提供一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条，其检测灵敏度高、特异性好、检测快速、准确。

还提供一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试剂卡，便于携带，快速、准确的检测。

还提供一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试剂盒，其使用便捷、操作简单，便于储存和运输。

为了解决以上技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条，包括硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上包被有相互分离且依次分布的封闭线、抗环瓜氨酸肽抗原检测线、羊抗鼠IgG质控线，所述封闭线上固相有荧光抗体线，所述封闭线和荧光抗体线的喷涂方式如下：