[发明专利]一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条、检测卡及试剂盒

权利要求书

1.一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条，其特征在于：包括硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上包被有相互分离且依次分布的封闭线、抗环瓜氨酸肽抗原检测线、羊抗鼠IgG质控线，所述封闭线上固相有荧光抗体线，所述封闭线和荧光抗体线的喷涂方式如下：

将配置好的封闭液以1.5μL/cm的喷量喷涂于硝酸纤维素膜上封闭线对应的位置，然后放在37℃条件下干燥0.5h，制得封闭线，将荧光抗体用荧光抗体稀释液按照1:10的比例稀释，混匀之后，以0.5μL/cm的喷量喷涂于干燥之后的封闭线正中间位置，制得荧光抗体线。

2.如权利要求1所述的一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条，其特征在于：所述荧光抗体的制备方法如下：

荧光抗体的标记：用PBS缓冲液将鼠抗人IgG抗体稀释到终浓度为2～10mg/mL，用纯水配制NaHCO₃，浓度为1mol/L，往稀释后的鼠抗人IgG抗体中加入NaHCO₃，NaHCO₃的终浓度为0.1～1 mol/L，剩余体积用PBS缓冲液补齐，加入荧光染料，荧光染料的终浓度为1～10mmol/L，混匀，启动微量振荡器，避光、室温标记反应15～60min；

荧光抗体的纯化：将标记结束的荧光抗体取出，通过葡聚糖凝胶柱进行分离纯化。

3.如权利要求1或2所述的一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条，其特征在于：所述封闭液包括以下组份：

20～100mM Tris；NaCL 0.1～1.5g；牛血清白蛋白0.5～3g；酪蛋白0.1～0.5g；PVP 0.1～5g；蔗糖1～10g；海藻糖1～3g；吐温0.01～0.1mL，Tris缓冲液的PH为8.0～8.5。

4.如权利要求1或2所述的一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条，其特征在于：所述荧光抗体稀释液包括以下组份：

20～100mM Tris；NaCL 0.1～1.5g；牛血清白蛋白0.5～3g；PVP 0.1～5g；蔗糖1～10g；海藻糖1～3g；Tris缓冲液的PH为8.0～8.5。

5.如权利要求1或2所述的一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条，其特征在于：所述抗环瓜氨酸肽抗原检测线的包被方法如下：

将抗环瓜氨酸肽抗原与载体蛋白偶联，载体蛋白经过55℃热破坏处理，载体蛋白为牛血清白蛋白；

将偶联后的抗环瓜氨酸肽抗原用抗原稀释液稀释到0.5mg/mL，以1.0μL/cm的喷量喷涂于硝酸纤维素膜相应的抗原检测线处；

所述羊抗鼠IgG质控线的包被方法如下：

用PBS缓冲液将羊抗鼠IgG稀释到1.0mg/mL，以1.0μL/cm的喷量喷涂于硝酸纤维素膜相应的质控检测线处。

6.如权利要求5所述的一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试纸条，其特征在于：所述抗原稀释液的制备方法如下：

60.5mgTris、0.9g的氯化钠、3g的海藻糖溶于100mL蒸馏水中，再加入10mL甘油混匀，过滤，装入广口瓶备用。

7.一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测卡，其特征在于：检测卡包括扣合的上盖和下盖，所述下盖上具有凹槽，所述凹槽内放置有权利要求1～6任一项权利要求所述的试纸条。

8.一种抗环瓜氨酸肽抗体的检测试剂盒，其特征在于：包括权利要求7所述的检测卡和样本稀释液，所述样本稀释液包括20～100mM Tris、NaCL 0.1～1.5g、酪蛋白0.1～0.5g、PEG 0.1～5g、明胶0.05～0.5g、S9 0.1～1mL、吐温0.1～1mL、PC300 0.1～1mL，Tris缓冲液的PH为8.0～8.5。