[发明专利]一种汞元素形态及价态分析中无机汞色谱峰柱效降低后的再恢复处理方法

说明书

本发明公开了一种汞元素形态及价态分析中无机汞色谱峰柱效降低后的再恢复处理方法，针对Hg²⁺色谱峰柱效降低、峰形变差的情况，提供了特制的再生处理试剂，以一定浓度的硝酸银作为水相，与一定比例的甲醇混合，通过依次采用预清洗、再生处理、置换清洗等步骤，解决了目前针对汞形态分析中Hg²⁺色谱峰形变差和展宽、色谱柱柱效降低等情况尚无有效处理方法的问题，针对性较强。

技术领域

本发明涉及食品药品检测分析领域，具体涉及一种针对汞元素形态及价态分析中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱分析汞形态时，二价汞(无机汞，Hg²⁺)色谱峰柱效降低后的再恢复处理方法。

背景技术

目前，采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用技术(HPLC-ICP-MS)分析样品中汞元素中二价汞(Hg²⁺，无机汞)、甲基汞(CH₃Hg)、乙基汞(CH₂CH₃Hg)等元素形态及价态的方法，在食品、药品领域已经得到广泛应用。

该方法分析中一般采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，流动相中添加半胱氨酸或巯基乙醇等与Hg²⁺、CH₃Hg、CH₂CH₃Hg形成络合物进行分离。Hg²⁺对十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱残留的硅羟基(-OH)具有较强的结合能力，由于样品基质的影响，分析一段时间后Hg²⁺色谱峰吸附、洗脱行为受到影响，出现色谱峰展宽、拖尾，柱效降低等情况，影响Hg²⁺与甲基汞色谱峰分离，导致无法准确定量，甚至出现Hg²⁺色谱峰消失，无法进行分析。

针对该问题，《中国药典》2020年版四部通则2322“汞、砷元素形态及价态分析法”附注(3)中，提到“进行汞元素形态及价态分析时，由于色谱柱中残留的未完全封端硅羟基对Hg²⁺的影响，导致柱效损失较快。建议采用封端覆盖率较高的色谱柱，且必要时在一定进样间隔，采用阀切换技术以高比例有机相冲洗色谱柱后，再继续分析”。现有液相色谱分析技术中，当遇到色谱柱的柱效降低，导致色谱峰展宽、拖尾等情况，多采用高比例有机相(甲醇、乙腈等)进行冲洗色谱柱，洗脱吸附在色谱柱的杂质，从而达到恢复柱效的目的，或直接更换新的色谱柱。但在实际实施中采用甲醇清洗色谱柱的步骤，对于柱效的恢复程度有限，冲洗后的Hg²⁺色谱峰也无法达到新色谱柱的柱效。因此色谱柱分析至一定量样品后，多数情况下只能更换色谱柱，使得测定成本大大增加。

因此，研发出一种在HPLC-ICP-MS分析汞元素形态及价态方法中有效恢复Hg²⁺色谱峰柱效、峰形的处理方法，对于提高方法准确度、降低分析成本十分重要，成为汞形态分析中急需解决的问题之一。

发明内容

针对现有HPLC-ICP-MS分析汞元素形态及价态的方法中，无机汞(Hg²⁺)色谱峰柱效降低、峰形变差，影响准确定量的问题，本发明提供了一种有效恢复Hg²⁺色谱峰形和柱效的处理方法。

本发明的第一方面，提供了一种应用于汞元素形态及价态分析中无机汞(Hg²⁺)色谱峰柱效降低后的再恢复的再生试剂，所述再生试剂由一定比例的硝酸银水溶液和甲醇组成。

优选地，所述硝酸银水溶液的硝酸银物质的量的浓度为0.1～0.5mmol/L。

优选地，所述硝酸银水溶液的硝酸银物质的量的浓度为0.1mmol/L。

优选地，所述再生试剂中包括质量浓度百分比为2～8％的甲醇。