[发明专利]一种他达那非及其类似物的乳胶微球免疫检测试剂盒及其制备和应用

说明书

本发明公开了一种他达那非及其类似物的乳胶微球免疫检测试剂盒及其制备和应用。本发明首先提供一种他达那非抗体‑乳胶微球标记物，基于该他达那非抗体‑乳胶微球标记物制备了一种乳胶微球免疫检测试剂盒，并通过优化乳胶微球抗体探针的制备，有效提高其检测实际样品的灵敏度；通过调节样品垫配方以适应液体和固体类样品的检测要求；精简样品前处理步骤，一步处理后即可完成样品前处理操作。本发明制备的检测他达那非及其类似物的乳胶微球免疫检测试剂盒具有简便、快速、直观、准确等优点，能够实现对样品的现场快速检测，符合市场需求，对保健食品中他达那非类药物的安全检测和初筛具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及食品药品安全检测技术领域，具体地，涉及一种他达那非及其类似物的乳胶微球免疫检测试剂盒及其制备和应用。

背景技术

他达那非，又名西力士，最早由ICOS礼来公司研发，因其与体内环PB鸟苷(cGMP)的结构相似，能有效抑制体内cGMP的特异性水解酶—5型PB二酯酶的(PDE5)的活性，减少cGMP的降解，增强阴茎勃起，可达到治疗男性阴茎勃起功能障碍(ED)的作用。因此，2003年11月经美国FDA批准，他达那非成为西地那非和伐地那非之后的第三种用于治疗男性勃起功能障碍(ED)的处方药，目前已在中国、美国、欧洲等100多个国家上市。

目前，国内外针对他达那非及其类似物的检测方法有多种，包括含高效液相色谱(HPLC)、液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)在内的仪器分析方法、光谱法、免疫分析法、电化学方法等等。仪器方法灵敏度高，特异性强，但需要昂贵的设备、专业的操作人员和繁琐的样品前处理，不适合大量样本的快速筛查；而免疫分析方法以其快速简单、成本低、灵敏度高、适合在实际生产中现场监控及大规模样本筛查等优势，在食品中药物残留检测领域发展迅速。其中，免疫检测法目前应用最广泛的包括有酶联免疫检测法(ELISA)以及免疫层析法(LFIAs)等。免疫层析法是将免疫和色谱层析技术相结合的检测方法，以标记物标记的抗体与目标待测物特异性结合为基础并通过标记物信号实现定性或定量的目的。该方法检测时间短，使用方便，前处理简单，且不需要专业培训过的人员即可简单的操作，成本低、携带十分方便，检测效果能满足需求，适合用于食品样品的现场检测。

现有针对他达那非及其类似物在食品样品中残留的免疫层析检测方法主要为胶体金、荧光微球免疫层析法，同时大多数只针对见检测单一对象，检测限较高，并且前处理步骤较复杂。比如专利CN 110133259 A公开了一种他达那非及其类似物的胶体金微孔法检测试剂盒，其对他达那非的最低检测限为0.2ng/mL，而且样品的前处理步骤复杂，检测时间较长。目前，针对他达那非类药物具有多样性的现状，执法部门非常有必要建立起保健食品中中他达那非类药物残留的免疫层析检测方法，以满足市场的需求。因此，建立一种快速、灵敏、准确、可靠的他达那非及其类似物的多残留免疫层析检测方法，对保健品中他达那非类药物的安全检测和初筛具有重要的意义。

发明内容

本发明旨在针对现有技术中对他达那非的检测灵敏度不高、检测耗时长的缺陷，提供一种他达那非及其类似物的乳胶微球免疫检测试剂盒及其制备和应用。本发明的乳胶微球免疫检测试剂盒通过优化乳胶微球抗体探针的制备，有效提高其检测实际样品的灵敏度；通过调节样品垫配方以适应不同样品的检测要求，精简样品前处理步骤，一步处理即可完成样品前处理的操作。

本发明的首要目的是提供一种他达那非抗体-乳胶微球标记物。

本发明的另一目的是提供所述他达那非抗体-乳胶微球标记物在非诊断目的检测他达那非或制备检测他达那非的试剂盒中的应用。

本发明的另一目的是提供一种他达那非和/或其类似物的乳胶微球免疫检测试剂盒。

本发明的另一目的是提供所述的乳胶微球免疫检测试剂盒在非诊断目的检测他达那非和/或他达那非类似物中的应用。

本发明的再一目的是提供一种非诊断目的检测他达那非和/或他达那非类似物的方法。