[发明专利]一种山羊PRNT基因单核苷酸多态性标记在性状早期选择中的应用有效
申请号: | 202110352715.3 | 申请日: | 2021-03-31 |
公开(公告)号: | CN112980935B | 公开(公告)日: | 2023-10-13 |
发明(设计)人: | 蓝贤勇;毕谊;罗弼豪;杨钰塔;张少丽;李洁;康雨欣;何礼邦;潘传英;朱海鲸;屈雷 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 范巍 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 山羊 prnt 基因 核苷酸 多态性 标记 性状 早期 选择 中的 应用 | ||
1.一种山羊PRNT基因单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:
以山羊基因组DNA为模板,通过PCR扩增山羊PRNT基因的部分片段,然后对扩增产物进行直接测序,根据测序结果鉴定山羊PRNT基因单核苷酸多态性位点的基因型,所述单核苷酸多态性位点选自山羊PRNT基因序列第149位突变位点g.149CT。
2.根据权利要求1所述一种山羊PRNT基因单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于:所述PCR的扩增引物对为:
上游引物:5’-GCCTTCTATATCTCTCTCCTCAC-3’
下游引物:5’-ATACTGCACTTCCCTATCTTCTT-3’。
3.根据权利要求1所述一种山羊PRNT基因单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于:所述PCR采用的反应程序为:95.0℃预变性5min;94.0℃变性30s,68.0℃复性30s,72.0℃延伸20s,每个循环复性温度减1℃,共18个循环;94.0℃变性30s,50.0℃复性30s,72.0℃延伸20s,共30个循环;72.0℃延伸10min。
4.根据权利要求1所述一种山羊PRNT基因单核苷酸多态性的检测方法,其特征在于:根据测序结果,所述单核苷酸多态性位点包括2种基因型,其中,野生纯合型基因型CC表现为测序图上单峰,杂合型基因型CT表现为测序图上双峰。
5.山羊PRNT基因序列第149位突变位点g.149CT在山羊分子标记辅助选择育种中的应用。
6.一种山羊PRNT基因单核苷酸多态性的检测试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括用于PCR扩增山羊PRNT基因单核苷酸多态性位点的引物对,所述单核苷酸多态性位点选自山羊PRNT基因序列第149位突变位点g.149CT。
7.根据权利要求6所述一种山羊PRNT基因单核苷酸多态性的检测试剂盒,其特征在于:所述引物对为:
上游引物:5’-GCCTTCTATATCTCTCTCCTCAC-3’
下游引物:5’-ATACTGCACTTCCCTATCTTCTT-3’。
8.如权利要求1所述的山羊PRNT基因单核苷酸多态性的检测方法在山羊分子标记辅助选择育种中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:所述山羊PRNT基因序列第149位突变位点g.149CT的杂合型基因型为提高山羊胸围和/或胸宽的DNA标记。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于:所述山羊选自陕北白绒山羊。
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