[发明专利]一种检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片及检测方法

说明书

本发明提供一种检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片及检测方法，包括本体，所述本体排布设置有反应部，所述反应部包括对称设置的主流道，所述主流道的一端连接有缓冲腔，所述缓冲腔设有出液口，所述出液口设有封堵组件，所述出液口连接有微流道，所述微流道连接有反应池；所述反应池包括用于检测鸡肉成分、猪肉成分、牛肉成分的至少一项反应池，在所述反应池中独立进行LAMP扩增反应。本发明将环介导等温扩增技术和微流控芯片技术应用到食品动物源性成分检测领域，实现快速、便捷、准确、高通量的检测，研制了同时检测多种食品动物源性成分的微流控芯片，实现多种动物源成分的快速检测，为动物源性成分检测方法的选择提供保障。

技术领域

本发明属于食品动物源性成分检测技术领域，具体涉及一种检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片及检测方法。

背景技术

我国近年来出现许多严重的肉类掺假问题，这些掺假行为严重地侵害了消费者权益、危害了消费者身体健康，也侵犯了部分消费者的民族宗教信仰。目前，许多国家已经建立了相应的标准，并对市场上的肉制品进行了规范管理，我国近年也对肉制品的动物源性成分项目进行抽样检验。

我国现行标准对动物肉源性成分进行检测鉴定方法主要是基于DNA的荧光定量PCR技术，但是该技术仅能对单个成分或少数几个成分同时进行检测。随着分子生物学技术的发展，衍生出很多新型PCR技术，例如环介导等温扩增技术，该方法仅需恒温设备即可完成扩增，比传统PCR技术更快捷。这两种方法每次检测通量较低，在大批量的检验检疫应用中，产生的工作量仍旧非常大。

基因芯片作为分子生物学上的一个技术突破，以其高通量的特点，在病毒、微生物检测等领域得到了广泛应用。碟式芯片是一种新型的基因芯片，现在国内外的应用还比较少，它具有24个检测通道，可以进行多指标的并行检测，用于食品中的动物源性成分检测，极具前景。选取牛、鸡、猪等多种动物源性成分，建立基于碟式芯片技术同时检测多种动物源性成分的方法，弥补常规检测方法的缺陷，为进一步拓展多种动物源性成分的高通量检测奠定基础。

环介导等温扩增技术（LAMP）是利用能识别靶序列上6个位点的4个特殊设计的引物和一种具有链置换活性的DNA聚合酶，在恒温条件下特异、高效、快速地扩增核酸的新技术。基因芯片技术是指将大量探针分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。

微流控芯片技术是一种新型的基因芯片技术，以其多指标并行检测、各检测孔反应均一、结果可控、易自动化的特点，为食品动物源性成分的检测提供了广阔的应用前景。微流控技术中，如何实现样本的较均匀的分配和分配后不同反应孔之间的物理隔离是两个关键技术点。现有技术中的微流控芯片，在高通量检测过程中，存在样本往不同反应腔体的分配不均匀，加样后就马上会进行反应，无法实现样品反应进程的控制。

随着社会经济的发展和国际食品安全水平的提高，引起人们对于动物源性成分鉴别问题的高度重视，对于食品的安全性也有了更高的警惕性，保障食品安全，保证消费者的食用健康是当前的重点，因此开发高通量、高灵敏度以及快速的食品动物源性成分检测方法势在必行。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片及检测方法，本发明中，通过在缓冲腔中设置封堵组件，可实现进样过程中样液先充满缓冲腔，再进入到反应池反应，可实现样本往不同反应池的均匀分配，同时各反应部独立设置，可杜绝不同反应池之间的交叉污染，实现高通量、高灵敏度和稳定的检测；本发明将环介导等温扩增技术和微流控芯片技术应用到食物动物源性成分检测领域，实现快速、便捷、准确、高通量的检测，研制了同时检测多种食品动物源性成分的微流控芯片，实现多种动物源成分的快速检测，为动物源性成分检测方法的选择提供保障。

本发明的技术方案为：