[发明专利]一种检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片及检测方法

权利要求书

1.一种检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片，其特征在于，包括本体，所述本体排布设置有反应部，所述反应部包括对称设置的主流道，所述主流道的一端连接有缓冲腔，所述缓冲腔设有出液口，所述出液口设有封堵组件，所述出液口连接有微流道，所述微流道连接有反应池；

所述封堵组件包括弹性挡板、限位板和弹性珠，所述弹性挡板设置于所述缓冲腔的中轴线区域，所述限位板对称设置于弹性挡板之间，所述弹性珠设置于所述限位板之间的区域；

所述反应池包括用于检测鸡肉成分、猪肉成分、牛肉成分的至少一项反应池，在所述反应池中独立进行LAMP扩增反应；

所述缓冲腔于弹性挡板与限位板之间的区域分别设有第一凹槽和第二凹槽，所述第一凹槽设置于所述出液口处；

所述弹性珠与第一凹槽配合连接，与出液口相抵；

所述弹性珠与第二凹槽配合连接，设置在弹性挡板与限位板之间的区域。

2.根据权利要求1所述的检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片，其特征在于，所述用于检测鸡肉成分的反应池中用于核苷酸扩增的引物组的序列为SEQ ID NO:1至SEQ IDNO:6；

所述用于检测猪肉成分的反应池中用于核苷酸扩增的引物组的序列为SEQ ID NO:7至SEQ ID NO:12；

所述用于检测牛肉成分的反应池中用于核苷酸扩增的引物组的序列为SEQ ID NO:13至SEQ ID NO:18。

3.根据权利要求2所述的检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片，其特征在于，所述碟式芯片还包括空白对照、阴性对照和扩增阳性对照的LAMP的反应池。

4.根据权利要求3所述的检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片，其特征在于，所述空白对照的反应池中不包埋任何模板；

所述阴性对照的反应池中用双蒸水代替DNA模板；

扩增阳性对照的反应池中包埋含有虾线粒体12SrRNA基因的DNA片段及其LAMP引物组，其引物组序列为SEQ ID NO:19至SEQ ID NO:22。

5.根据权利要求1所述的检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片，其特征在于，所述弹性挡板与缓冲腔壁面的最小间距小于或等于弹性珠的直径；所述弹性珠的直径是所述出液口的宽度的1.2-1.6倍。

6.根据权利要求1所述的检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片，其特征在于，所述主流道的另一端设置有连接孔；所述反应部通过连接孔连通；所述本体的水平截面为圆形，所述反应部以本体的圆心为基点阵列排布设置于所述本体。

7.一种权利要求1-6任一项所述的检测食品动物源性成分的高通量碟式芯片的检测方法，其特征在于，包括以下具体步骤：

1）制备高通量碟式芯片：

2）提取待检样本的核酸；

3）恒温扩增反应体系的配制：

在体系区，吸取恒温扩增试剂加入离心管中，盖好管盖后将所述离心管移至模板加样区；

在所述模板加样区，加入步骤2）的核酸；

4）高通量碟式芯片加样：

在模板区，吸取在步骤3）配制好的核酸扩增反应体系，从进出样口将所述配制好的核酸扩增反应体系加入到所述高通量碟式芯片主通道中；

取封口膜，覆盖于进出样口上；

将加样后的所述高通量碟式芯片在低速离心机上离心备用；

5）恒温扩增：

预热恒温扩增微流控芯片核酸分析仪；

将所述高通量碟式芯片送入核酸分析仪中；

在65℃下恒温扩增60分钟；

6）结果判读；

7）检测完成后使用软件对荧光数据进行处理和分析。