[发明专利]中华眼镜蛇咬伤猪模型的制备及用途

权利要求书

1.一种中华眼镜蛇咬伤猪模型的制作方法及用途，其特征在于，包括：选择健康的猪，将眼镜蛇蛇毒冻干粉溶解后注射入猪腿部肌肉处，6h后可获得目标动物模型，此模型克服了以往在动物实验时容易在短时间内中毒死亡的缺点，该模型模拟人类被眼镜蛇咬伤中毒的过程，可用来研究其发病的临床表征、病理生理机制和精准化治疗等，具体包括以下两个步骤：（1）探索猪肌肉注射眼镜蛇蛇毒的LD₅₀；（2）建立眼镜蛇咬伤的猪模型。

2.根据权利要求1所述，探索猪肌肉注射眼镜蛇蛇毒的LD₅₀，其特征在于将眼镜蛇蛇毒冻干粉溶解于生理盐水后肌肉注射，其LD₅₀可信区间为5-7mg/kg。

3.根据权利要求2所述，其特征在于猪腿部肌肉注射眼镜蛇蛇毒的LD₅₀为6mg/kg。

4.根据权利要求1制备眼镜蛇咬伤的猪模型，所述其特征在于：注射眼镜蛇蛇毒的剂量根据猪的体重，以0.56～3.5mg/kg剂量配制蛇毒。

5.根据权利要求4所述，其特征在于：注射眼镜蛇蛇毒制作猪模型的最佳剂量为2mg/kg。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于蛇毒的体积按猪体重的0.2ml/kg进行注射。

7.根据权利要求1所述制备眼镜蛇咬伤的猪模型，特征在于：注射眼镜蛇毒后，观察猪的生物学行为状态包括精神运动状态、呼吸情况、眼耳口鼻分泌状况等；并结合血液检测指标的白细胞计数（WBC）、超敏C反应蛋白（hs—CRP）、乳酸脱氢酶（LDH）、AST/ALT、肌酸激酶同工酶（CK-MB）等，再根据猪的心肌、肌肉组织等HE染色病理检查结果，制备眼镜蛇咬伤的猪模型。

8.根据权利要求1眼镜蛇咬伤的猪模型的用途，其特征在于：所制作的猪模型模拟眼镜蛇咬伤人类后的病理生理过程，有助于动态分析眼镜蛇咬伤后的发病临床表现和机制，该模型可为研究中华眼镜蛇蛇毒的在人体代谢变化以及肌肉坏死机理提供良好的动物模型，可用于研究在鉴定蛇伤种类、咬伤后临床表现、精准化治疗，抗毒蛇咬伤药物的筛选及抗蛇毒血清疗效的评价等方面的研究。