[发明专利]一种全细胞催化L-精氨酸合成反式-4-羟基-L-脯氨酸的方法在审
| 申请号： | 202110333266.8 | 申请日： | 2021-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN112877318A | 公开（公告）日： | 2021-06-01 |
| 发明（设计）人： | 饶志明;龙梦飞;乔郅钠;徐美娟;杨套伟;张显;邵明龙 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/53;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/24;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 催化 精氨酸 合成 反式 羟基 脯氨酸 方法 | ||
1.鸟氨酸环化脱氨酶突变体，其特征在于，所述突变体以NCBI登录号为WP_010954390所示的氨基酸为亲本，将亲本的第162位和/或第205位氨基酸位氨基酸突变。
2.根据权利要求1所述突变体，其特征在于，所述突变体为(a)～(c)所示任一：
(a)将亲本第162位的苏氨酸突变为丙氨酸；
(b)将亲本第205位的赖氨酸突变为甘氨酸；
(c)将亲本第162位的苏氨酸突变为丙氨酸，同时将第205位的赖氨酸突变为甘氨酸。
3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。
4.携带权利要求3所述基因的载体。
5.携带权利要求3所述基因的微生物细胞。
6.一种生产反式-4-羟基-L-脯氨酸的方法，其特征在于，以同时表达L-精氨酸羟化酶、L-精氨酸酶及权利要求1所述突变体的重组菌发酵生产反式-4-羟基-L-脯氨酸。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，编码所述L-精氨酸羟化酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述L-精氨酸酶来源于Bacillus amyloliquefaciens。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，将OD600为0.6-0.8的重组菌以反应体系的5-15％量添加。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在25-35℃下培养不少于20小时。
10.权利要求1或2所述突变体，或权利要求5所述微生物细胞在制备反式-4-羟基-L-脯氨酸中的应用。
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