[发明专利]一种新型CCK8细胞活力检测试剂盒及其应用有效
申请号: | 202110333184.3 | 申请日: | 2021-03-29 |
公开(公告)号: | CN113122607B | 公开(公告)日: | 2022-01-04 |
发明(设计)人: | 谢素瑶;朱宇;陈泽新;黄敏 | 申请(专利权)人: | 创芯国际生物科技(广州)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;C12Q1/32 |
代理公司: | 广州容大知识产权代理事务所(普通合伙) 44326 | 代理人: | 刘新年 |
地址: | 510600 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新型 cck8 细胞 活力 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种CCK8检测试剂盒,其特征在于:包括添加因子一和添加因子二;所述添加因子一包括以下终浓度的组分:透明质酸酶0.5-1mg/mL,EDTA0.1-0.5mg/mL,盐酸0.02-0.05mol/L;所述添加因子二包括以下终浓度的组分:wst-8 0.08-0.2mg/mL,1-Methoxy PMS 0.05-0.3mg/mL,钙盐0.1-0.5mg/mL;所述钙盐包括氯化钙、硝酸钙、硫酸钙、磷酸钙中的至少一种;所述添加因子一和所述添加因子二的溶剂均为无菌水。
2.根据权利要求1所述的一种CCK8检测试剂盒,其特征在于:所述添加因子一的制备及保存方法为:按照组分的终浓度配料,将透明质酸酶、EDTA和盐酸混合均匀并溶解后,0.22μm滤膜过滤,于-20℃保存。
3.根据权利要求1所述的一种CCK8检测试剂盒,其特征在于:所述添加因子二的制备及保存方法为:按照组分的终浓度配料,将wst-8、1-Methoxy PMS、钙盐和无菌水混合均匀并溶解后,0.22μm滤膜过滤,于-20℃保存。
4.根据权利要求1所述的一种CCK8检测试剂盒,其特征在于:所述钙盐为氯化钙。
5.权利要求1~4任意一项所述的一种CCK8检测试剂盒在类器官药敏活力检测中的应用。
6.一种类器官药敏活力检测方法,其特征在于:包括:
(1)将类器官样本接种于孔板中,培养48-72h后进行药物接触;
(2)加药96h后在孔板中加入权利要求1~4任意一项所述的试剂盒的添加因子一继续培养20~30min;
(3)继续在孔板中加入权利要求1~4任意一项所述的试剂盒的添加因子二培养2-4h,于450nm进行活力检测。
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