[发明专利]一种石斛夜光丸的含量测定方法

说明书

本发明公开了一种石斛夜光丸的含量测定方法，该方法以柚皮苷、新橙皮苷、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re与人参皂苷Rb₁为对照品，采用高效液相色谱法测定石斛夜光丸中人参（人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁）、麸炒枳壳（新橙皮苷、柚皮苷）的含量。采用本发明的含量测定方法考察石斛夜光丸中人参、麸炒枳壳的质量情况，能快速、准确地检查出企业是否存在不投料或少投料、伪劣药材投料的行为。

技术领域

本发明涉及中医药质量检测技术领域，具体是一种石斛夜光丸的含量测定方法。

背景技术

石斛夜光丸由石斛、人参、山药、茯苓、甘草、肉苁蓉、枸杞子、菟丝子、地黄、熟地黄、五味子、天冬、麦冬、苦杏仁、防风、川芎、麸炒枳壳、黄连、牛膝、菊花、盐蒺藜、青葙子、决明子、水牛角浓缩粉、山羊角等二十五味中药组成。除水牛角浓缩粉外，山羊角锉研成细粉，其余石斛等二十三味药材粉碎成细粉；将水牛角浓缩粉与上述粉末配研，过筛，混匀。每100g粉末用炼蜜35～50g加适量的水制丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜95～120g制成小蜜丸或大蜜丸，即得。石斛夜光丸具滋阴补肾、清肝明目之功效；临床用于肝肾两亏，阴虚火旺，内障目暗，视物昏花。石斛夜光丸现行标准【含量测定】控制的指标为黄连中的盐酸小檗碱，不能有效、整体性评价石斛夜光丸的质量。

贾元印等人以北京、济南、广州等7个厂家石斛夜光丸为样品，用薄层扫描法测定样品中人参二醇及人参三醇的含量，建立了测定方法，为制定石斛夜光丸的质控标准提供了参考（贾元印,赵渤年,刘青,刘永俊.石斛夜光丸中人参二醇及人参三醇的含量测定.中国中药杂志,1995,20(12):732-735.）。但是由于薄层扫描法容易受温度、薄层板、点样量等因素影响，含量测定结果准确率不稳定，且人参的主要有效成分为人参皂苷，而该文章中是以人参皂苷的水解产物人参二醇及人参三醇为指标进行含量测定的，并试验了多种方法均显示由于成分干扰严重并不能直接测定样品中主要皂苷的含量，因此，其方法并不能准确反应石斛夜光丸中人参的真实质量，依然需要进行深入研究寻找到适用于建立石斛夜光丸含量检测标准的方法。

发明内容

本发明提供了一种石斛夜光丸的含量测定方法，本发明通过高效液相色谱法建立柚皮苷、新橙皮苷、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re与人参皂苷Rb₁的含量测定方法，以考察石斛夜光丸中人参、麸炒枳壳的质量情况，能快速、准确地检查出企业是否存在不投料或少投料、伪劣药材投料的行为。

一种石斛夜光丸的含量测定方法，具体步骤如下：

（1）色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按以下表1进行梯度洗脱；流速为1.0mL/min；用高温型蒸发光散射检测器检测，理论板数按人参皂苷Rg₁峰计算应不低于3000。

（2）混合对照品溶液制备：精密称取柚皮苷、新橙皮苷、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re与人参皂苷Rb₁适量，加70%甲醇制成每1mL含柚皮苷与新橙皮苷各0.5mg、人参皂苷Rg₁与人参皂苷Re各0.1mg、人参皂苷Rb₁0.2mg的混合对照品溶液。

（3）供试品溶液的制备：取石斛夜光丸水蜜丸，研碎，取6g；或取石斛夜光丸小蜜丸或大蜜丸，剪碎，取9g；精密称定，置具塞锥形瓶中，加入体积浓度为70%的甲醇溶液100mL，称定重量，加热回流1h，取出，放冷，再称定重量，用体积浓度为70%的甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液50mL，蒸干，残渣加水20mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次25mL，取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。