[发明专利]一种虎奶菇原生质体制备方法有效
| 申请号： | 202110330306.3 | 申请日： | 2021-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN113005042B | 公开（公告）日： | 2023-06-13 |
| 发明（设计）人： | 陈磊;胡艳红;毕黄词;张卓敏;陈献忠;杨海泉 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12N1/00;C12R1/645 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 虎奶菇 原生 质体 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种虎奶菇原生质体制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
（1）用渗透压稳定剂洗涤虎奶菇菌丝体；
（2）向步骤（1）洗涤后的菌丝体加入β-巯基乙醇预处理，过滤收集菌丝体，再以渗透压稳定剂洗涤；
（3）将步骤（2）洗涤后的菌丝体与酶溶液混合并反应1~4 h，过滤收集滤液；
（4）将收集的滤液离心去除上清，用渗透压稳定剂洗涤沉淀，获得虎奶菇原生质体；
所述渗透压稳定剂为0.6 mol/L的蔗糖溶液；
步骤（3）中所述的菌丝体与酶溶液混合是指向菌丝体中加入2~5倍体积的酶活为10~30U/mL的纤维素酶溶液；
步骤（3）中所述的过滤采用cloth纸膜过滤。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述的虎奶菇菌丝体为培养至对数生长期的虎奶菇菌丝体。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的β-巯基乙醇浓度为0.3%，添加量为浸没过菌丝体。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的预处理指室温下对菌丝体浸没20 min。
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