[发明专利]用于同时检测9项呼吸道感染病原体IgM抗体的组合物、试剂盒及检测方法

权利要求书

1.用于同时检测9项呼吸道感染病原体IgM抗体的组合物，其特征在于，包括组分A和组分B，

所述组分A含有9种包被不同抗原的磁性荧光编码微球，所述抗原分别为嗜肺军团菌血清1型抗原、肺炎支原体抗原、Q热立克次体抗原、肺炎衣原体抗原、腺病毒抗原、呼吸道合胞病毒抗原、甲型流感病毒抗原、乙型流感病毒抗原和副流感病毒抗原，所述9种磁性荧光编码微球的粒径和/或荧光强度不同；

所述组分B含有荧光物质标记的抗人IgM抗体；

所述组分B中的荧光物质与组分A的磁性荧光编码微球中的荧光物质不同。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述9种磁性荧光编码微球为粒径不同的单荧光的磁性编码微球，或粒径相同的双荧光磁性编码微球。

3.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求1或2中所述的组合物。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，还包括校准品，所述校准品包括嗜肺军团菌血清1型IgM抗体、肺炎支原体IgM抗体、Q热立克次体IgM抗体、肺炎衣原体IgM抗体、腺病毒IgM抗体、呼吸道合胞病毒IgM抗体、甲型流感病毒IgM抗体、乙型流感病毒IgM抗体及副流感病毒IgM抗体。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，还包括洗涤液和/或定容液中。

6.一种用于以非诊断目的同时检测9项呼吸道感染病原体IgM抗体的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：将权利要求1中的组合物加入到待测样本中，温育；

S2：磁力吸附磁性荧光编码微球；

S3：利用流式细胞仪检测步骤S2中的磁性荧光编码微球。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述S1中，先将组分A加入到待测样本中，温育10-30min；再将组分B加入到待测样本中，温育10-30min。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述组分A的制备方法包括如下步骤：

1）磁性荧光编码微球的活化：向磁性荧光编码微球中加入EDC，室温混匀，置于磁力架上沉降，弃掉上清，得到活化的编码微球；

2）抗原的包被：将嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒，吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒的抗原分别溶解，分别加入到活化后的磁性荧光编码微球中，室温混匀，置于磁力架上沉降，弃掉上清，得到包被有抗原的磁性荧光编码微球；

3）向2）中分别加入含有1%BSA的PBS溶液，室温混匀，进行封闭，置于磁力架上沉降，弃掉上清；

4）将3）中的所有的磁性荧光编码微球混合在一起即得组分A。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述组分B的制备方法包括如下步骤：

A）抗人IgM抗体的活化：利用PBS缓冲液将抗人IgM抗体配制成溶液，按抗人IgM抗体：SMCC的摩尔比为20:1的比例加入SMCC溶液，室温反应，透析除去未反应的SMCC；

B）PE的活化：利用PBS缓冲液将PE配制成溶液，加入DTT，室温反应，透析除去未反应的DTT；

C）将活化后的抗人IgM抗体与活化后的PE混合，在2-8℃反应20h，然后加入马来酰亚胺终止反应即得组分B。

10.根据权利要求6-9中任一项所述的方法，其特征在于，所述待测样本为血清。