[发明专利]一种快速总核酸提取方法及试剂盒

说明书

本发明涉及一种快速总核酸提取方法及试剂盒，主要用于生物样本中核酸的提取，属于核酸检测技术领域。该试剂盒包括提取液、洗涤液、洗脱液和96孔板，所述的提取液包括裂解液和磁珠；所述的提取液、洗涤液和洗脱液预先分装在96孔板中。本发明调整了试剂盒的组分以及组分的配方，减少了组分数量、减少了操作步骤，缩短了提取流程时间；同时试剂盒采取预分装的形式，可以直接在核酸提取仪上使用，操作更简便，避免了手动分装出错的问题，整体提高了提取效率。本发明还涉及一种采用该试剂盒的快速总核酸提取方法，该方法操作更简便，提高了核酸的提取效率。

技术领域

本发明涉及一种快速总核酸提取方法及试剂盒，主要用于生物样本中核酸的提取，属于核酸检测技术领域。

背景技术

随着核酸检测技术的不断进步，从生物样本中提取核酸的方法也在不断进步，而核酸提取试剂即是进行核酸检测之前需要用到的样本前处理试剂，决定了提取到的核酸质量，也影响着完成整个核酸检测所需要的时间。

目前市场上核酸提取试剂盒种类繁多，应用场景也不一而同。随着核酸提取仪的逐渐兴起，采用磁珠法的核酸提取试剂盒越来越多，其主要组分通常包括裂解液、洗涤液1、洗涤液2、磁珠和洗脱液，这些组分以不同体积分装于试剂瓶或试剂管中，组成了不同的试剂盒。现有大多的核酸提取试剂盒操作步骤如下：

1.在离心管中加入100μl样本；

2.再加入1mL裂解液，振荡混匀；

3.在50℃恒温孵育30分钟后，加入15μl磁珠，用移液器上下吹打混匀；

4.室温放置10分钟；

5.将离心管放置于磁力架上静置1分钟，待磁珠完全吸附后，吸弃上清；

6.将离心管从磁力架上取下，加入1mL洗涤液1用移液器上下吹打混匀；

7.将离心管放置于磁力架上静置1分钟，待磁珠完全吸附时，吸弃上清；

8.不要移动离心管，轻柔加入1mL洗涤液2，静置30秒后再吸弃上清；

9.取下离心管后放置在65℃恒温中开盖干燥1min；

10.加入70μl事先在65℃预热的洗脱液到离心管中，振荡混匀或用移液器吹打混匀，65℃恒温孵育5分钟；

11.将离心管放置于磁力架上静置1分钟，待磁珠完全吸附后小心将核酸溶液转移至新的离心管中。

可以看出，现有的试剂盒主要缺陷在于：

第一、组分通常是瓶装或管装，在应用于核酸提取仪时，需要手工按照说明书指定的体积分装到96孔板里，不仅操作麻烦，而且96孔板孔数较多，且孔与孔之间间隔小，在手工分装时容易发生装错孔的情况，从而得出错误的试验结果；

第二、现有的核酸提取试剂盒组分较多，核酸提取过程需要经历裂解和两次洗涤，最后再洗脱，组分越多意味着步骤越多、流程耗时越长、核酸损失越多，进而核酸的得率也越低。

因此，本发明所要解决的问题是提供一种快速总核酸提取方法及试剂盒，其操作更简便、操作步骤更少，整体提高提取效率。

发明内容

本发明的目的是为了提供一种快速总核酸提取试剂盒，该试剂盒提取核酸操作更简便、提取效率更高。