[发明专利]一种快速总核酸提取方法及试剂盒在审
| 申请号: | 202110327140.X | 申请日: | 2021-03-26 | 
| 公开(公告)号: | CN112795564A | 公开(公告)日: | 2021-05-14 | 
| 发明(设计)人: | 刘杰;杨钦;胡彬 | 申请(专利权)人: | 苏州博捷特生物科技有限公司 | 
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 | 
| 代理公司: | 杭州五洲普华专利代理事务所(特殊普通合伙) 33260 | 代理人: | 丁少华 | 
| 地址: | 215300 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 快速 核酸 提取 方法 试剂盒 | ||
1.一种快速总核酸提取试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括提取液、洗涤液、洗脱液和96孔板,所述的提取液包括裂解液和磁珠;所述的提取液、洗涤液和洗脱液预先分装在96孔板中。
2.根据权利要求1所述的快速总核酸提取试剂盒,其特征在于:所述提取液的裂解液含有Tris、EDTA、异硫氰酸胍和TritonX-100;所述的洗涤液为乙醇溶液;所述的洗脱液含有Tris和EDTA。
3.根据权利要求1所述的快速总核酸提取试剂盒,其特征在于:所述的提取液包括5-50μl的磁珠。
4.根据权利要求3所述的快速总核酸提取试剂盒,其特征在于:所述的提取液包括10μl的磁珠。
5.根据权利要求2所述的快速总核酸提取试剂盒,其特征在于:所述乙醇溶液为浓度70%-80%的乙醇溶液。
6.根据权利要求2所述的快速总核酸提取试剂盒,其特征在于:所述的裂解液含有0.1MTris、0.2M EDTA、3M异硫氰酸胍和2.5%Triton X-100。
7.一种采用权利要求1-6所述任意一项快速总核酸提取试剂盒的快速总核酸提取方法,其特征在于:该快速总核酸提取方法包括以下步骤:
A.往含有提取液的孔中加入样本;
B.往孔中插入磁棒套,上下振荡混匀,加热至65℃孵育5-15分钟;
C.往磁棒套中插入磁棒,静置1分钟,吸附磁珠;
D.将磁珠转移至含有洗涤液的孔中,抽出磁棒,磁棒套上下振荡混匀;
E.再次往磁棒套中插入磁棒,静置1分钟,吸附磁珠;
F.将磁珠转移到含有洗脱液的孔中,抽出磁棒,磁棒套上下振荡混匀;
G.在65℃孵育5分钟后,再次插入磁棒,静置1分钟,吸附磁珠后移走,剩余即为提取完成的核酸样品。
8.根据权利要求7所述的快速总核酸提取方法,其特征在于:所述步骤B中的孵育时间为10分钟。
9.根据权利要求7所述的快速总核酸提取方法,其特征在于:所述的提取液为400μl,所述的洗涤液为400μl,所述的洗脱液为50-100μl,所述的样本为200μl。
10.根据权利要求9所述的快速总核酸提取方法,其特征在于:所述的洗脱液为80μl。
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