[发明专利]一种超顺磁修饰中性粒细胞外泌体仿生囊泡药物递送生物制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种超顺磁修饰中性粒细胞外泌体仿生囊泡药物递送生物制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将外周血中性粒细胞与抗肿瘤药物共同培养，得摄取药物的中性粒细胞；每1×10⁶个所述外周血中性粒细胞与50μg的抗肿瘤药物共同培养；所述抗肿瘤药物为阿霉素脂质体；

2）对所述摄取药物的中性粒细胞进行离心，重悬底部缓冲垫，得细胞悬液；

3）对所述细胞悬液进行连续物理挤压和梯度过滤，得中性粒细胞外泌体仿生囊泡包裹药物悬液；所述梯度过滤包括依次通过1μm、400nm和200nm聚碳酸酯过滤膜；

4）对所述中性粒细胞外泌体仿生囊泡包裹药物悬液离心后，重悬底部NNV-药物缓冲垫，得NNV-药物悬液；

5）将所述NNV-药物悬液与超顺磁材料混合后共孵育，对共孵育后的混合液进行磁分离，得超顺磁修饰中性粒细胞外泌体仿生囊泡药物递送生物制剂；所述超顺磁材料为SPION-Tf，所述SPION-Tf在所述NNV-药物悬液中的浓度为0.5mg/ml；所述磁分离包括利用钕磁铁进行磁分离，MF=1T。

2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤1）所述共同培养的温度为37℃，时间为12~24h。

3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤2）所述离心包括差速离心，所述差速离心的离心力为800g，离心时间为5min。

4.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤3）所述物理挤压包括使用mini-extrader挤压器对所述细胞悬液进行11次连续的物理挤压。

5.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤4）所述离心包括超速离心，所述超速离心的离心力为10000g，离心时间为80min。

6.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤5）所述共孵育的温度为4℃，时间为4h。

7.利用权利要求1~6任一项所述制备方法制备得到的超顺磁修饰中性粒细胞外泌体仿生囊泡药物递送生物制剂。