[发明专利]FMR1基因CGG重复数及甲基化检测试剂盒和检测方法有效
| 申请号： | 202110322943.6 | 申请日： | 2021-03-25 |
| 公开（公告）号： | CN113151406B | 公开（公告）日： | 2022-06-21 |
| 发明（设计）人： | 张俊杰;刘晶晶;刘福平;董玉莲 | 申请（专利权）人： | 深圳会众生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/683 | 分类号： | C12Q1/683;C12Q1/6869;C12Q1/6883 |
| 代理公司： | 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 | 代理人： | 刘瑞花 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市宝安区航*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | fmr1 基因 cgg 复数 甲基化 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种FMR1基因CGG重复数及甲基化检测试剂盒，其特征在于，包括：
限制性内切酶，所述限制性内切酶用以酶切样本的基因组DNA；
磁珠，所述磁珠连接有第一修饰基团；以及
捕获探针，所述捕获探针连接有第二修饰基团，所述第二修饰基团用以连接所述第一修饰基团，以将所述磁珠和所述捕获探针偶联，偶联所述磁珠的所述捕获探针用以特异性结合酶切下来的DNA片段；
其中，所述第一修饰基团和所述第二修饰基团均包括氨基，两所述氨基在戊二醛的作用下聚合，以使所述磁珠和所述捕获探针偶联；
所述捕获探针包括上游探针和下游探针；
所述上游探针包括F10，所述F10如SEQ ID No：10所示的核苷酸序列十和连接所述核苷酸序列十5’端的第二修饰基团；
所述下游探针包括R10，所述R10如SEQ ID No：20所示的核苷酸序列二十和连接所述核苷酸序列二十5’端的第二修饰基团；
所述限制性内切酶包括PmlI和NaeI。
2.一种FMR1基因CGG重复数及甲基化检测试剂盒，其特征在于，包括：
限制性内切酶，所述限制性内切酶用以酶切样本的基因组DNA；以及
偶联磁珠的捕获探针，所述偶联磁珠的捕获探针用以特异性结合酶切下来的DNA片段；
其中，所述磁珠连接有第一修饰基团，所述捕获探针连接有第二修饰基团，所述第一修饰基团连接所述第二修饰基团；
所述第一修饰基团和所述第二修饰基团均包括氨基，两所述氨基在戊二醛的作用下聚合，以使所述磁珠和所述捕获探针偶联；
所述捕获探针包括上游探针和下游探针；
所述上游探针包括F10，所述F10如SEQ ID No：10所示的核苷酸序列十和连接所述核苷酸序列十5’端的第二修饰基团；
所述下游探针包括R10，所述R10如SEQ ID No：20所示的核苷酸序列二十和连接所述核苷酸序列二十5’端的第二修饰基团；
所述限制性内切酶包括PmlI和NaeI。
3.如权利要求1或2所述的FMR1基因CGG重复数及甲基化检测试剂盒，其特征在于，还包括：
酶切反应液；以及
预杂交液。
4.如权利要求3所述的FMR1基因CGG重复数及甲基化检测试剂盒，其特征在于，所述磁珠的直径可以大于或等于0.1μm，且小于或等于9μm。
5.如权利要求4所述的FMR1基因CGG重复数及甲基化检测试剂盒，其特征在于，所述磁珠直径为1μm。
6.如权利要求3所述的FMR1基因CGG重复数及甲基化检测试剂盒，其特征在于，所述PmlI识别目的序列上游的位点cac|gtg，所述NaeI识别目的序列下游的位点gcc|ggc。
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