[发明专利]一种心肌肌钙蛋白的寡核苷酸适配体及其应用

权利要求书

1.一种心肌肌钙蛋白的寡核苷酸适配体，其特征在于，所述适配体的序列为SEQ IDNO.3或SEQ ID NO.6。

2.如权利要求1所述的心肌肌钙蛋白的寡核苷酸适配体，其特征在于，所述心肌肌钙蛋白为心肌肌钙蛋白I。

3.一种如权利要求1所述的心肌肌钙蛋白的寡核苷酸适配体的应用，其特征在于：该应用是制备包括所述适配体的试剂盒，所述试剂盒的作用是用于心肌肌钙蛋白检测。

4.一种如权利要求1所述的心肌肌钙蛋白的寡核苷酸适配体的应用，其特征在于：该应用是将所述适配体用于非诊断目的心肌肌钙蛋白的检测。

5.如权利要求4所述的心肌肌钙蛋白的寡核苷酸适配体的应用，其特征在于，所述应用包括心肌肌钙蛋白的分离纯化和检测步骤：

封闭步骤：将样品置于酶标板中进行孵育后，除去液体，以封闭液封闭经孵育的样品；

结合步骤：在经封闭处理的样品中加入经生物素修饰的适配体，温育后除去液体，得到适配体和蛋白的结合物；

洗涤步骤：将结合物进行洗涤；

检测步骤：每孔加临用前配制的1:5000的Streptavidin/HRP20-200μL，酶标板覆膜，37℃温育30min-1h；弃去孔内液体，甩干，洗板5次；每孔加TMB底物溶液20-200μL，酶标板覆膜，37℃避光显色约15-30min；每孔加终止液50μL，终止反应，此时蓝色立转黄色；用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度值(OD)。

6.如权利要求4所述的心肌肌钙蛋白的寡核苷酸适配体的应用，其特征在于，所述应用包括心肌肌钙蛋白的分离纯化和检测步骤：

封闭步骤：在链霉亲和素中加入经生物素修饰的适配体，温育后除去液体，适配体置于酶标板中，以封闭液封闭适配体；

结合步骤：在经封闭处理的适配体中加入样品进行孵育，再加入经地高辛修饰的适配体进行温育，得到适配体和蛋白的结合物；

洗涤步骤：将结合物进行洗涤；

检测步骤：每孔加临用前配制的1:500-5000的抗地高辛抗体/HR P 20-200μL，酶标板覆膜，37℃温育30min；弃去孔内液体，甩干，洗板5次；每孔加TMB底物溶液20-200μL，酶标板覆膜，37℃避光显色约15-30min；每孔加终止液50μL，终止反应，此时蓝色立转黄色；用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度值(OD)。

7.如权利要求4所述的心肌肌钙蛋白的寡核苷酸适配体的应用，其特征在于，所述应用包括心肌肌钙蛋白的分离纯化和检测步骤：

封闭步骤：在链霉亲和素中加入经生物素修饰的适配体，温育后除去液体，适配体置于酶标板中，以封闭液封闭适配体；

结合步骤：在经封闭处理的适配体中加入样品进行孵育，再加入心肌肌钙蛋白抗体进行温育，得到适配体、蛋白和抗体的结合物；

洗涤步骤：将结合物进行洗涤；

检测步骤：每孔加临用前配制的1:500-10000的二抗/HRP 50-200μL，酶标板覆膜，37℃温育30min；弃去孔内液体，甩干，洗板5次；每孔加TMB底物溶液50-200μL，酶标板覆膜，37℃避光显色约15-30min；每孔加终止液50μL，终止反应，此时蓝色立转黄色；用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度值(OD)。

8.如权利要求4所述的心肌肌钙蛋白的寡核苷酸适配体的应用，其特征在于，所述应用包括心肌肌钙蛋白的分离纯化和检测步骤：

封闭步骤：心肌肌钙蛋白抗体置于酶标板中，将心肌肌钙蛋白抗体以封闭液进行封闭；

结合步骤：在经封闭处理的心肌肌钙蛋白抗体中加入样品进行孵育，再加入经地高辛修饰的适配体进行温育，得到以抗体、蛋白和适配体的结合物；

洗涤步骤：将结合物进行洗涤；

检测步骤：每孔加临用前配制的1:500-5000的抗地高辛抗体/HR P 50-200μL，酶标板覆膜，37℃温育30min；弃去孔内液体，甩干，洗板5次；每孔加TMB底物溶液50-200μL，酶标板覆膜，37℃避光显色约15-30min；每孔加终止液50μL，终止反应，此时蓝色立转黄色；用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度值(OD)。