[发明专利]一种含有外泌体的生发液的制备方法

说明书

本发明公开了一种含有外泌体的生发液的制备方法，包括以下步骤：制备脐带提取物；清洗脐带；剪断脐带，并放入培养基中进行培养；过滤组织液，并提取上清液，得到脐带提取物；提取外泌体；首先剥离血管，然后进行培养组织，最后进行消化冻存；取细胞培养，然后取其上清液，接着进行离心，再进行重悬沉淀，最后储存备用；制备生发液；将提取的外泌体使用脐带提取物进行重悬，即可制备成含有外泌体的生发液，本发明通过采用脐带华通氏胶中包含的多种生长因子，能够极大的改善和修复受损的头皮细胞，同时通过配合间充质干细胞来源的外泌体，其具有磷脂双层膜结构，可直接进入细胞，并影响细胞功能，从而达到修复头皮衰老细胞的目的。

技术领域

本发明属于生发液的制备领域，具体为一种含有外泌体的生发液的制备方法。

背景技术

现有生活中，生发液是添加了各种功能性成份以达到固发、生发目的的特殊用途化妆品，主要分为中药生发液和西药生发液，前者主要是在乙醇溶中添加各种西药成份制成，而后者则是由姜根提取物、何首乌提取物、川芎提取物、熟地黄提取物、当归提取物、人参提取物等中药成份制成。

而中药生发液主要通过调节气血、清热祛湿、滋肝补肾，促使头皮功能正常化，促进头皮血液循环，使毛发再生速度加快、毛囊数量增多、胶原纤维排列更紧密有序、乳酸脱氢酶表达上调，也可能具有增强毛发韧性、改善发质、固发的功效，而西药生发液主要使头皮局部血管舒张，刺激男性秃发和斑秃患者头发再生，但是不论是中药生发液，还是西药生发液，都无法对受损的头皮细胞进行改善和修复，同时也无法进入细胞，从而影响细胞功能，达到修复头皮衰老细胞的效果。

发明内容：

本发明的目的就在于为了解决上述问题而提供一种含有外泌体的生发液的制备方法，解决了背景技术中提到的问题。

为了解决上述问题，本发明提供了一种技术方案：

一种含有外泌体的生发液的制备方法，包括以下步骤：

S1、制备脐带提取物；

S11、清洗脐带；

S12、剪断脐带，并放入培养基中进行培养；

S13、过滤组织液，并提取上清液，得到脐带提取物；

S2、提取外泌体；

S21、首先剥离血管，然后进行培养组织，最后进行消化冻存；

S22、取细胞培养，然后取其上清液，接着进行离心，再进行重悬沉淀，最后储存备用；

S3、制备生发液；

S31、将步骤S2中提取的外泌体使用步骤S1中的脐带提取物进行重悬，即可制备成含有外泌体的生发液；

S32、制备完成之后，对其进行保存。

作为优选，所述步骤S11的具体操作为：首先采用HBSS将脐带上的血迹清洗干净，然后采用酒精将其浸泡3分钟，再用HBSS将其表面的酒精清洗干净。

作为优选，所述步骤S12的具体操作为：首先将步骤S11中得到的脐带剪成2-3cm的小段，然后用眼科剪将脐带剪成4mm左右大小的组织块，接着将组织块转移到50ml的离心管中，并添加20ml无血清培养基，然后将其置于4摄氏度的环境下培养72h。

作为优选，所述步骤S13的具体操作为：收集经过步骤S12中培养72h之后的培养基的上清液，并用细胞筛过滤掉组织块，然后将收集到的上清液置于-80摄氏度进行保存，即为脐带提取物。