[发明专利]龟肽的生产方法

说明书

本发明属生物制备技术领域，涉及一种龟肽的生产方法，取成年活龟经宰杀、清洗、去骨后破碎成龟肉糜浆体；将龟甲提取物与龟肉糜浆体混合并经超声波均质化后，用超纯水调制成底物溶液，加入蛋白酶进行酶解；酶解所得反应产物经灭酶、灭菌、超滤法分离、真空冷冻干燥后得到可溶性粉末状龟肽。本发明以多种龟种复合组分为原料应用酶解法生产的龟肽，最大限度地提取了成龟中的活性肽分子，同时保存了原料中的其他生物活性成分，诸多生物活性成分相辅相成，能有效地调节免疫、抗氧化、抗肿瘤、抗疲劳、调节血脂、改善睡眠、延缓衰老，从而达到滋阴壮阳、强身健体、美容养颜、延年益寿的作用。

技术领域

本发明属生物制备技术领域，涉及一种龟肽的生产方法，具体地说，涉及一种多龟种来源、以及氨基酸聚合度相对均匀分布的龟肽的生产方法。

背景技术

现代科学研究发现，在中国传统文化中有着“长寿、吉祥”寓意的龟类之所以长寿，不仅因为它们独特的生理结构和生活习性，还因为它们体内含有丰富的调节免疫、抗氧化、抗肿瘤、抗疲劳、调节血脂、改善睡眠、延缓衰老等功能的生物活性物质，比如不饱和脂肪酸、维生素E、硒等微量元素、活性蛋白、胶原蛋白、游离脂肪酸等，使之得以幸免于癌症、心脑血管疾病、糖尿病等人类最常见的疾病。

研究成果表明，肽是构成蛋白质的重要成分。同时，作为构成所有人体细胞的基本材料，肽涉及到人体中激素、神经、生殖，以及细胞的更新、代谢、生长、修复等多个领域。肽还具有调节体内各个系统器官和细胞的生理功能。现今，在各种来源的肽当中，龟肽极可能是肽中的皇冠，同时，有关龟肽的研究成果也对我国龟类入药、保健养生的悠久药食传统提供了有力的科学佐证，还为开发有益于人类健康长寿的养生食品、保健食品、特医食品乃至生物药品指明了方向。

目前，以龟类生物为原料制备龟肽的方法，均采用单一龟种作为原料，且要么以活龟组织为原料，要么以龟甲胶为原料，通过酶解法制取龟肽，但龟肽产品的成分受到局限，没法体现全龟成分。

发明内容

本发明的目的是提供一种龟肽的生产方法，以多种龟种进行搭配，分别取龟组织、龟甲作为原料来源，应用酶解法生产的龟肽，最大限度地提取了成龟中的活性肽分子，同时保存了原料中的其他生物活性成分，诸多生物活性成分相辅相成，能有效地调节免疫、抗氧化、抗肿瘤、抗疲劳、调节血脂、改善睡眠、延缓衰老，从而达到滋阴壮阳、强身健体、美容养颜、延年益寿的作用。

本发明所采用的技术方案：

一种龟肽的生产方法，其步骤如下：

1、取不同种类的成年活龟经宰杀、清洗、去骨，按重量等份数比例将龟肉混合后经机械破碎、超声波破碎成龟肉糜浆体。

所述不同种类的成年活龟是指金钱龟(即三线闭壳龟)、石金钱龟(即黄喉拟水龟)、中华草龟、乌龟、鳄鱼龟、黄缘盒龟、苏卡达龟、大头龟、平胸龟、箱龟、锦龟或泥龟中的3种或3种以上。

所述龟肉糜浆体中的固形物不超过10目。

2、按重量比为1：1～10的比例取龟甲提取物(按专利CN104946488A中所述的方法制备)与龟肉糜浆体混匀并均质化后，再用超纯水制备成5～50％(W/V)的底物溶液。

3、在底物溶液中加入0.1～1.0mg/mL蛋白酶，恒温条件下酶解，期间调节pH至5～8(用0.01～0.5mol/L的NaOH或HCl来调节pH值)。

所述蛋白酶为胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶中的一种、二种或二种以上复合。

所述恒温的温度是40～70℃。

所述的酶解时间为1～24h。

4、将酶解产物灭酶、灭菌后，依次用截留分子量分别为9KD、6KD以及3KD的超滤膜过滤，获得4种不同分子量的龟肽酶解液，其分子量分别为：大于9KD、6～9KD、3～6KD和小于3KD。