[发明专利]一种测定MSC组织分布的方法在审
申请号: | 202110311237.1 | 申请日: | 2021-03-24 |
公开(公告)号: | CN113046423A | 公开(公告)日: | 2021-06-29 |
发明(设计)人: | 曲纳;温丁可;韩镇;谭毅;马贺然 | 申请(专利权)人: | 山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司;银丰生物工程集团有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12Q1/6888 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 牛芳 |
地址: | 250101 山东省济南市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 测定 msc 组织 分布 方法 | ||
1.一种测定MSC组织分布的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将人间充质干细胞输注实验鼠体内,每隔一定时间对需监测器官或组织取样并提取DNA样品;
(2)以确定数量的人间充质干细胞提取DNA并稀释成系列浓度的DNA溶液;
(3)以如序列SEQ ID NO:1和2所示的序列为引物,以步骤(1)中的DNA样品和步骤(2)中的DNA溶液为模板进行实时荧光定量PCR;
(4)步骤(2)中系列浓度的DNA溶液的CT值制作标准曲线,计算步骤(1)中DNA样品的数量。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述实验鼠选自小鼠、大鼠或裸鼠。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述人间充质干细胞的来源选自胎盘、脐带、骨髓、脂肪或血液。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述人间充质干细胞的流式细胞检测为CD73、CD105、CD44、CD90阳性率均在98%以上,CD34、CD45、HLA-DR检测阴性率在0.2%以下。
5. 根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述实时荧光定量PCR以SYBR Green为荧光染料。
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