[发明专利]一种检测猫消化道传染病原体的核酸组合物、试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开了一种检测猫消化道传染病原体的核酸组合物、试剂盒及检测方法，涉及分子生物技术体外诊断技术领域。本发明提供了一种检测猫消化道传染病原体的核酸组合物及试剂盒，该核酸组合物及其试剂盒可最多实现猫泛白细胞减少症病毒和猫冠状病毒的快速准确检测，这对于猫消化道疾病的临床诊断及治疗有着重要的意义。本发明提供的核酸组合物及试剂盒具有检测灵敏度高、特异性好、检测限低的技术优势，检测用时短，有利于发病猫的早期诊断和治疗。

技术领域

本发明涉及分子生物技术体外诊断技术领域，具体而言，涉及一种检测猫消化道传染病原体的核酸组合物、试剂盒及检测方法。

背景技术

猫消化道传染病是猫常见的临床疾病，以不同程度的胃肠道症状为主要特征。而猫泛白细胞减少症病毒(Feline Panleukopenia Virus，FPV)和猫冠状病毒(FelineCoronavirus，FCoV)是临床危害猫消化道的常见病原体。其中，FPV常伴随：引起猫的发热(40℃以上)、腹泻、脱水和明显的白细胞减少等特征，死亡率高，该病传染性极强且排毒方式多样，病猫、康复猫及隐形感染带毒猫都会通过排泄物及分泌物排毒；FCoV感染在猫群中极为普遍，单独感染仅出现轻微的肠胃炎，部分不表现任何临床症状，但与FPV混合感染时，临床症状明显加重。

目前，临床常用诊断方法多为免疫荧光抗体检测、血清学检测、病毒分离鉴定等技术，但仍存在灵敏度低、检测周期长及检测病原单一的缺点。普通PCR方法可特异性的扩增病毒的基因片段，灵敏度较高，但需在扩增后进行凝胶电泳分析，容易造成污染。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测猫消化道传染病原体的核酸组合物、试剂盒及检测方法以解决上述技术问题。

本发明是这样实现的：

本发明提供了一种核酸组合物在制备用于检测猫消化道传染病原体的试剂盒中的应用，核酸组合物包括：用于检测猫泛白细胞减少症病毒的第一试剂和/或用于检测猫冠状病毒的第二试剂，第一试剂包括引物对1和/或探针1，第二试剂包括引物对2和/或探针2，引物对1的序列如SEQ ID NO.1-2所示，探针1的序列如SEQ ID NO.3所示，引物对2的序列如SEQ ID NO.4-5所示，探针2的序列如SEQ ID NO.6所示。

在本发明应用较佳的实施方式中，上述探针1和探针2的5’端均标记有荧光报告基团，探针1和探针2的3’端均标记有荧光淬灭基团。

在本发明应用较佳的实施方式中，上述荧光报告基团为HEX、FAM、TET、CF532、JOE、TAMRA、ROX、CY3、CY5、Texas Red、NED、Alexa Flour或VIC，淬灭基团为MGB、TAMRA、BHQ1、BHQ2、BHQ3或QSY；

优选地，每个探针的5’端均标记有不同的荧光报告基团。

本发明还提供了一种检测猫消化道传染病原体的核酸组合物，其包括用于检测猫泛白细胞减少症病毒的第一试剂和/或用于检测猫冠状病毒的第二试剂，第一试剂包括引物对1和/或探针1，第二试剂包括引物对2和/或探针2，引物对1的序列如SEQ ID NO.1-2所示，探针1的序列如SEQ ID NO.3所示，引物对2的序列如SEQ ID NO.4-5所示，探针2的序列如SEQ ID NO.6所示。

本发明还提供了一种试剂盒，其包括上述的核酸组合物。

本发明还提供了一种猫消化道传染病原体的检测方法，其包括：以待测核酸样本为模板序列，采用上述的核酸组合物，或者采用上述的试剂盒进行检测；上述的检测方法不以疾病的诊断或治疗为目的。