[发明专利]一种检测猫消化道传染病原体的核酸组合物、试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 202110310938.3 | 申请日： | 2021-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN112899406A | 公开（公告）日： | 2021-06-04 |
| 发明（设计）人： | 王佳琳;孙依欣;张晓婷 | 申请（专利权）人： | 上海基灵生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 陈秋梦 |
| 地址： | 201100 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 消化道 传染 病原体 核酸 组合 试剂盒 方法 | ||
1.一种核酸组合物在制备用于检测猫消化道传染病原体的试剂盒中的应用，其特征在于，所述核酸组合物包括：用于检测猫泛白细胞减少症病毒的第一试剂和/或用于检测猫冠状病毒的第二试剂，所述第一试剂包括引物对1和/或探针1，所述第二试剂包括引物对2和/或探针2，所述引物对1的序列如SEQ ID NO.1-2所示，所述探针1的序列如SEQ ID NO.3所示，所述引物对2的序列如SEQ ID NO.4-5所示，所述探针2的序列如SEQ ID NO.6所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述探针1和所述探针2的5’端均标记有荧光报告基团，所述探针1和所述探针2的3’端均标记有荧光淬灭基团。
3.根据权利要求2所述的核酸组合物，其特征在于，所述荧光报告基团为HEX、FAM、TET、CF532、JOE、TAMRA、ROX、CY3、CY5、Texas Red、NED、Alexa Flour或VIC，所述淬灭基团为MGB、TAMRA、BHQ1、BHQ2、BHQ3或QSY。
4.根据权利要求3所述的核酸组合物，其特征在于，每个探针的5’端均标记有不同的荧光报告基团。
5.一种检测猫消化道传染病原体的核酸组合物，其特征在于，其包括用于检测猫泛白细胞减少症病毒的第一试剂和/或用于检测猫冠状病毒的第二试剂，所述第一试剂包括引物对1和/或探针1，所述第二试剂包括引物对2和/或探针2，所述引物对1的序列如SEQ IDNO.1-2所示，所述探针1的序列如SEQ ID NO.3所示，所述引物对2的序列如SEQ ID NO.4-5所示，所述探针2的序列如SEQ ID NO.6所示。
6.一种试剂盒，其特征在于，其包括权利要求5所述的核酸组合物。
7.一种猫消化道传染病原体的检测方法，其特征在于，其包括：以待测核酸样本为模板序列，采用权利要求5所述的核酸组合物，或者采用权利要求6所述的试剂盒进行检测；
所述方法不以疾病的诊断或治疗为目的。
8.根据权利要求7所述的猫消化道传染病原体的检测方法，其特征在于，检测手段为PCR检测，所述待测核酸样本为待测RNA样本时，所述PCR检测的程序包括：50-52℃，逆转录10-20min；95-96℃，预变性2-10min；94-96℃，变性2-10s，58-60℃，退火和延伸共20-40s，循环10-40次。
9.根据权利要求7所述的猫消化道传染病原体的检测方法，其特征在于，检测手段为PCR检测，所述待测核酸样本为DNA样本时，所述PCR扩增检测的程序包括95-96℃，预变性2-10min；94-96℃，变性2-10s，58-60℃，退火和延伸共30-40s，循环30-40次。
10.根据权利要求7所述的猫消化道传染病原体的检测方法，其特征在于，当所述核酸组合物含有所述第一试剂和第二试剂时，所述试剂盒中第一试剂的引物对1的工作浓度为0.1-20μM，探针1的工作浓度为0.1-20μM，所述试剂盒中第二试剂的引物对2的工作浓度为0.1-20μM，探针2的工作浓度为0.1-20μM。
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