[发明专利]一种用于氟啶虫酰胺农药速测的试纸条及其制备方法及检测方法

说明书

一种用于氟啶虫酰胺农药速测的试纸条及其制备方法及检测方法，该试纸条包括一PVC衬板，PVC衬板上沿长度方向依次设置有吸水垫、硝酸纤维素膜、金标抗体结合垫和样品垫，金标抗体结合垫上包被有胶体金标记的农药特异性兔多抗，硝酸纤维素膜上包被有农药小分子完全抗原的检测线和羊抗兔IgG二抗质控线。速测法：将样品切碎，称取5g待测样品于5mL样品稀释液中，充分震荡混匀，提取完成后静置取上清液滴加2～3滴到样品垫进行层析反应，5～10分钟后根据检测线和质控线的显色情况直接判断样品中氟啶虫酰胺及其代谢物农药的阴阳性结果。本发明具有操作简便、灵敏度高、适用于现场速测、结果简单可视等优点，同时制备工艺简单，成本低，实用性能好。

技术领域

本发明属于竞争性金标免疫层析法技术领域，涉及一种用于氟啶虫酰胺农药速测的试纸条及其制备方法及检测方法。

背景技术

氟啶虫酰胺(Flonicamid)，又名N-氰甲基-4-(三氟甲基)烟酰胺，是一种新型的有选择性的低毒吡啶酰胺类杀虫剂，对蚜虫等各种刺吸式口器害虫有效，该药剂通过阻碍害虫吮吸作用而致效，害虫摄入药剂后很快停止吮吸，最后饥饿而死。因为氟啶虫酰胺具有最小抵抗力交叉和哺乳动物急性毒性较低的特点，目前已被许多国家广泛使用在农作物上，如水稻、水果和蔬菜，用于控制蚜虫和其他刺吸式口器昆虫。氟啶虫酰胺作为一种较为新颖的杀虫剂具有广阔的未来市场，目前其单剂或复配制剂在我国的登记数量已达近三十种农作物。

然而，氟啶虫酰胺可携带到农产品中，并增加人类接触。为了保护消费者的健康，采用灵敏可靠的分析方法对氟啶虫酰胺的残留进行监测具有重要意义。近年来，许多氟啶虫酰胺残留的测定方法在不同类型的样本已被报道，这些方法包括气相色谱法(GC)、高效液相色谱(HPLC)和高效液相色谱质谱(HPLC-MS)。虽然这些方法具有很高的精度和灵敏度，但它们需要长时间的样品前处理程序和复杂的仪器分析程序，同时这些仪器也不适于大规模和现场分析。因此，要求采用更简单、更经济的方法来测定氟啶虫酰胺的残留量。而免疫分析正好满足这些要求，是筛选分析的可靠分析工具。目前已有针对氟啶虫酰胺的酶联免疫吸附检测方法，确实有潜在的市场应用前景，但检测需要多步反应，仍不能真正实现现场快速筛查。相对来讲，胶体金免疫层析检测法对仪器设备要求不高，对样品处理和检测环境要求低，一般无需对样品进行复杂的预处理，简单、快速、便携、经济，灵敏度高、特异性强，易于在基层普及和推广，可满足快速分析检测的需要，尤其适宜现场筛选和大量样品的快速分析。

因此，为了满足氟啶虫酰胺的快速检测，需要研制出一种对氟啶虫酰胺灵敏度高、特异性好的胶体金免疫层析试纸条。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种操作简便、灵敏度高的氟啶虫酰胺农药速测的试纸条，用于对氟啶虫酰胺农药的现场速测，具有结果简单可视的优点。

本发明所要解决的第二个技术问题是提供一种氟啶虫酰胺农药速测的试纸条的制备方法。

本发明所要解决的第三个技术问题是提供一种氟啶虫酰胺农药的速测方法，采用上述试纸条进行测试，具有操作简便、灵敏度高、结果简单可视的特点。

本发明解决上述第一个技术问题所采用的技术方案为：一种氟啶虫酰胺农药速测的试纸条，该试纸条是基于间接竞争免疫层析法金标速测试纸条，包括一条形的PVC衬板，PVC衬板上沿长度方向从左至右依次设置有吸水垫、硝酸纤维素膜、金标抗体结合垫和样品垫，其特征在于：其中金标抗体结合垫上包被有胶体金标记的农药特异性兔多抗，硝酸纤维素膜上包被有农药小分子完全抗原的检测线和羊抗兔IgG二抗质控线。

作为优选，所述硝酸纤维素膜粘贴在PVC衬板的中间位置，金标抗体结合垫的左半部分粘贴在硝酸纤维素膜的右端上方，样品垫粘贴在金标抗体结合垫的右半部分上方，样品垫的右端与PVC衬板的右端齐平，吸水垫的左端与PVC衬板的左端齐平，吸水垫的右端粘贴在硝酸纤维素膜的上方，且盖住2.5～3.5mm。