[发明专利]一种用于检测β-乳球蛋白的胶体金免疫层析试纸及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种用于检测β‑乳球蛋白的胶体金免疫层析试纸及其制备方法和应用，所述试纸包括金标垫、样品垫、吸水垫和NC膜，所述金标垫中含有胶体金标记的鼠抗牛β‑乳球蛋白单克隆抗体，所述NC膜上设置有T检测线和C质控线。本发明的胶体金免疫层析试纸具有操作简单、成本低、携带方便、方便快速、灵敏度高等优点，检测过程不需要专业技术，任何人都可以现场操作，应用前景广泛。

技术领域

本发明涉及乳品检测技术领域，具体涉及一种用于检测β-乳球蛋白的胶体金免疫层析试纸及其制备方法和应用。

背景技术

营养学研究表明，羊乳及其制品具有营养丰富、易吸收、不易导致过敏等优点。近年来羊乳产业不断发展，已成为我国乳业的重要组成部分。但是我国奶羊场规模小，奶羊生长慢，泌乳期短，产乳量少，且极易受季节的影响，因此羊乳资源相对匮乏，市场价格较高。由于牛乳在外观、营养成分上与羊乳极为相似，所以市场中存在羊乳中掺入牛乳来降低生产成本，达到盈利目的现象。这种行为不仅扰乱经济秩序，欺骗消费者，更损害了牛乳过敏者的身心健康。为了保证羊乳产品的质量，维护消费者利益，急需建立一种能够现场检测羊乳中是否掺入牛乳的快速检验方法。

而目前的检验方法有非免疫学方法和免疫学方法，非免疫学方法包括色谱技术、电泳技术、聚合酶链式反应（PCR）技术，检测过程耗时较长，对技术人员和机器设备要求高，检测成本高，不易普及；免疫学方法能够克服非免疫学方法的不足，如酶联免疫吸附（ELISA）法和胶体金免疫层析技术等，但是现有的检测方法最低检测线高、准确度低限制了其推广应用。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种用于检测β-乳球蛋白的胶体金免疫层析试纸及其制备方法和应用。

本发明采用胶体金免疫层析试纸制备试纸条，该试纸条包括样品垫、金标垫、NC膜和吸水垫；其中金标垫中含有胶体金标记的鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体，NC膜上设置有T检测线和C质控线，其中T检测线喷涂有鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体，C质控线喷涂有羊抗鼠IgG的抗体。

本发明采用的技术方案之一为：

一种用于检测β-乳球蛋白的胶体金免疫层析试纸，所述试纸包括金标垫、样品垫、吸水垫和NC膜，所述金标垫中含有胶体金标记的鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体，所述金标记的鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体以鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体量记为0.25μg/cm²，所述NC膜上设置有T检测线，所述T检测线上鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体以牛β-乳球蛋白单克隆抗体量计为0.00625μg/cm²。

进一步地，所述NC膜上还设置有C质控线，所述C质控线上含有羊抗鼠IgG的抗体，所述C质控线上羊抗鼠IgG的抗体以羊抗鼠IgG抗体量计为0.00625μg/cm²。

本发明采用的技术方案之二为：

一种本发明所述胶体金免疫层析试纸的制备方法，包括：

S1：将胶体金标记的鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体溶液喷涂至金标垫上；

S2：将鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体溶液喷涂至NC膜的T检测线上；

S3：将羊抗鼠IgG抗体溶液喷涂至NC膜的C质控线上；

S4：将金标垫、样品垫、吸水垫、NC膜组装成试纸；

所述金标垫上胶体金标记的鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体以鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体量记为0.25μg/cm²；

所述T检测线上鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体以牛β-乳球蛋白单克隆抗体量计为0.00625μg/cm²；

所述C质控线上羊抗鼠IgG的抗体以羊抗鼠IgG抗体量计为0.00625μg/cm²。

进一步地，本发明一个实施例中，包括：

S5：鼠抗牛β-乳球蛋白单克隆抗体的制备及纯化；