[发明专利]纳米磁珠包被物及其制备方法、检测试剂和检测试剂盒

权利要求书

1.一种纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将抗体的铰链区的二硫键还原，制备具有巯基的抗体片段；及

将所述具有巯基的抗体片段、双功能交联剂及纳米磁珠混合反应，制备纳米磁珠包被物。

2.根据权利要求1所述的纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，所述双功能交联剂选自马来酰亚胺类双功能交联剂、碘乙酸类双功能交联剂和乙酰化巯基类双功能交联剂中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，所述双功能交联剂包括马来酰亚胺类双功能交联剂；所述马来酰亚胺类双功能交联剂选自4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯、4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐及马来酰亚胺-(PEG)n-琥珀酰亚胺酯中的至少一种，其中，n为2～24之间的整数，或所述马来酰亚胺类双功能交联剂选自1-(2-氨乙基)马来酰亚胺盐酸盐及N-ε-马来酰亚胺己酸酰肼中的至少一种；

及/或，所述双功能交联剂包括碘乙酸类双功能交联剂；所述碘乙酸类双功能交联剂选自碘乙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯及琥珀酰亚胺酯(4-碘乙酸)氨基苯甲酸酯中的至少一种；

及/或，所述双功能交联剂包括乙酰化巯基类双功能交联剂；所述乙酰化巯基类双功能交联剂选自N-丁二酸S-乙酰乙酸酯和N-丁二酸-(PEG)m-S-乙酰乙酸酯中的至少一种，其中，m为2～24之间的整数。

4.根据权利要求1所述的纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，用于还原所述抗体的铰链区的二硫键的还原剂为巯基乙胺，所述抗体与所述还原剂的质量之比为1：(1～50)；

及/或，所述具有巯基的抗体片段与所述双功能交联剂和所述纳米磁珠的质量比为1：(0.5～10)：(5～100)。

5.根据权利要求1所述的纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，在所述将抗体的铰链区的二硫键还原的步骤之后，还包括对还原的产物进行除杂的步骤。

6.根据权利要求1所述的纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，所述抗体片段为单克隆抗体的抗体片段。

7.根据权利要求1～6任一项所述的纳米磁珠包被物的制备方法，其特征在于，所述抗体为CHI3L1抗体。

8.一种纳米磁珠包被物，其特征在于，由权利要求1～7任一项所述的纳米磁珠包被物的制备方法制得。

9.一种检测试剂，其特征在于，包括权利要求8所述的纳米磁珠包被物。

10.一种检测试剂盒，其特征在于，包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂含有能与抗原特异性结合的经标记物标记的抗体，所述第二试剂含有权利要求8所述的纳米磁珠包被物，所述纳米磁珠包被物也能与所述抗原特异性结合，且所述纳米磁珠包被物与所述抗原结合的位点，与所述经标记物标记的抗体与所述抗原结合的位点不同。