[发明专利]鉴别布鲁氏菌疫苗株A19与野毒株的引物、探针及应用在审
| 申请号： | 202110295989.3 | 申请日： | 2021-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN113025734A | 公开（公告）日： | 2021-06-25 |
| 发明（设计）人： | 张春红;刘志成;沈海燕;马祥;孙俊颖;张建峰;廖明 | 申请（专利权）人： | 广东省农业科学院动物卫生研究所;岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京盛询知识产权代理有限公司 11901 | 代理人： | 陈巍 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴别 布鲁氏菌 疫苗 a19 野毒株 引物 探针 应用 | ||
1.一种鉴别布鲁氏菌疫苗株A19与野毒株的引物和探针，其特征在于，所述引物包括如SEQ ID NO：1所示的上游引物和如SEQ ID NO：2所示的下游引物；所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。
2.如权利要求1所述的鉴别布鲁氏菌疫苗株A19与野毒株的引物和探针，其特征在于，所述探针核苷酸序列的5'端连接荧光基团、3'端连接淬灭基团，所述荧光基团选自FAM、HEX、VIC、CY5、TET中的任意一种；所述淬灭基团选自BHQ系列和TAMRA系列中的任意一种。
3.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求1或2所述的引物和探针。
4.一种权利要求1或2所述的引物和探针、或权利要求3所述的试剂盒在快速区分布鲁氏杆菌A19疫苗株与野毒株中的应用。
5.一种鉴别布鲁氏菌疫苗株A19与野毒株的方法，其特征在于，包括利用权利要求1所述的引物和探针扩增样品DNA模板获取扩增产物，以及对所述扩增产物进行熔解曲线分析确定样品病毒类型的步骤。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，扩增体系包括以下组分：Luna UniversalProbe qPCR Master Mix 5.0μL，上游引物0.8μL，下游引物0.4μL，探针0.4μL，模板1.0μL以及ddH2O 2.4μL。
7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，扩增反应条件：95℃预变性1min；95℃变性15s，60℃退火30s；循环55次。
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