[发明专利]一种芘修饰的G-四链荧光探针及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种芘修饰的G-四链荧光探针，其特征在于，包括还原氧化石墨烯和吸附在所述还原氧化石墨烯表面上的芘修饰的G-四链体DNA序列；

所述芘修饰的G-四链体DNA序列的碱基序列为5'-TTT TTU₁^*GGG TTA GGG TTA GGG TTAGGG-3'或5'-TTT T U₁^*U₁^*GGG TTA GGG TTA GGG TTA GGG-3'，

其中，

2.一种如权利要求1所述的芘修饰的G-四链荧光探针的制备方法，其特征在于，包括步骤：

提供尿嘧啶磷酸盐衍生物及还原氧化石墨烯；

利用所述尿嘧啶磷酸盐衍生物，通过DNA固相合成仪合成所述G-四链体DNA序列；

以所述G-四链体DNA序列为模板，通过点击反应，制备得到所述芘修饰的G-四链体DNA序列；

将所述还原氧化石墨烯与所述芘修饰的G-四链体DNA序列进行孵化，得到所述芘修饰的G-四链荧光探针。

3.根据权利要求2所述的芘修饰的G-四链荧光探针的制备方法，其特征在于，所述尿嘧啶磷酸盐衍生物的制备步骤包括：

提供5-三炔丙基胺-2'-脱氧尿苷、4，4'-双甲氧基三苯甲基氯、2-氰乙基-N,N-二异丙基氯代亚磷酰胺；

将所述5-三炔丙基胺-2'-脱氧尿苷与所述4，4'-双甲氧基三苯甲基氯进行反应，分离纯化后得到5'-DMT-5-三炔丙基胺-2'-脱氧尿苷；

将所述5'-DMT-5-三炔丙基胺-2'-脱氧尿苷与所述2-氰乙基-N,N-二异丙基氯代亚磷酰胺进行反应，分离纯化后得到所述尿嘧啶磷酸盐衍生物。

4.根据权利要求3所述的芘修饰的G-四链荧光探针的制备方法，其特征在于，所述5-三炔丙基胺-2'-脱氧尿苷由5-碘代-2'-脱氧尿苷和三炔丙基胺制备得到。

5.根据权利要求2所述的芘修饰的G-四链荧光探针的制备方法，其特征在于，所述还原氧化石墨烯的制备步骤包括：

以石墨为原料，利用Hummer法制备得到氧化石墨烯；

将所述氧化石墨烯进行还原，得到所述还原氧化石墨烯。

6.根据权利要求2所述的芘修饰的G-四链荧光探针的制备方法，其特征在于，以所述G-四链体DNA序列为模板，通过点击反应，制备得到所述芘修饰的G-四链体DNA序列的步骤包括：

将所述G-四链体DNA序列与CuSO₄-TBTA溶液、1-(叠氮基甲基)芘溶液、NaHCO₃水溶液、二甲亚砜混合后进行避光反应，分离纯化后得到所述芘修饰的G-四链体DNA序列。

7.根据权利要求2所述的芘修饰的G-四链荧光探针的制备方法，其特征在于，将所述还原氧化石墨烯与所述芘修饰的G-四链体DNA序列进行孵化，得到所述芘修饰的G-四链荧光探针的步骤包括：

将所述芘修饰的G-四链体DNA序列加入到缓冲液中在室温下进行第一次孵化；

然后再加入还原氧化石墨烯并充分分散，在室温下进行第二次孵化，得到所述芘修饰的G-四链荧光探针。

8.一种如权利要求1所述的芘修饰的G-四链荧光探针在制备检测凝血酶荧光探针中的应用。