[发明专利]一种甘胆酸的测定试剂及其制备方法

说明书

本发明提供了一种甘胆酸的测定试剂及其制备方法，涉及生化手段测试技术领域，该测定试剂包括R1试剂、R2试剂和甘胆酸标准样；所述R1试剂包括：硫代氧化型辅酶I、缓冲液和羟基乙叉二膦酸；所述R2试剂包括：还原型辅酶I、缓冲液、甘胆酸脱氢酶、叠氮钠、乙醇、卵磷脂和丁基羟基茴香醚；所述甘胆酸标准样包括：甘胆酸钠水合物、缓冲液和叠氮钠。该测定试剂制备方法简单，在测定甘胆酸时，具有准确度、稳定性高，线性范围广且重复性好的特点。

技术领域

本发明涉及生化手段测试技术领域，具体涉及一种脑神经营养治疗的中长链结构脂质组合制备方法。

背景技术

血清甘胆酸(Cholyglycine,CG)是胆酸与甘氨酸结合而成的结合型胆酸之一，在肝细胞内，胆固醇经过极其复杂的酶促反应，转变成初级胆汁酸。其中有胆酸(CA)和鹅去氧胆酸(CD-CA)。胆酸的类固醇核上有三个羟基(C3、C7、C12)，侧链末端的羟基以肽键与甘氨酸结合，分子量为462u。CG在肝细胞合成，经胆管排入胆囊贮存，餐后胆囊收缩，随同胆汁排入小肠，参与脂肪的消化吸收，95％的胆酸由小肠粘膜重吸收入血，经门静脉输送至肝脏由肝细胞摄取。正常情况下，肝脏能有效摄取门静脉血中99％以上的CG重新泌入胆汁，仅有1％CG溢入体循环。当肝细胞受损时，肝细胞不能有效摄取经肠肝循环达肝脏的CG，致使血中CG含量增高；胆汁淤滞时，肝脏排泄胆酸发生障碍而返流入血循环中，也可使血中CG含量增高。

目前，国内测定甘胆酸的方法主要有：(1)乳胶增强免疫比浊法，该方法灵敏度较低，易出现前带现象；(2)化学发光法，该方法虽然灵敏度高，但不稳定，重复性较差以及(3)酶联免疫法，该方法定量准确性差，操作时间长，自动化程度低，一般只用于定性检测。中国专利CN105588936A公开了一种甘胆酸的测定试剂及其制备方法，该试剂包括R1试剂、R2试剂和甘胆酸标准样，R1试剂是由硫代氧化型辅酶溶解于添加有缓冲液的纯化水中所形成的溶液；R2试剂是由还原型辅酶溶解于添加有缓冲液、甘胆酸脱氢酶、叠氮钠的纯化水中所形成的溶液；甘胆酸标准样是由甘胆酸钠水合物、缓冲液和叠氮钠溶解于纯化水中形成的溶液。将上述试剂用于甘胆酸测定，具有快速灵敏、准确性好、特异性高、稳定性好等优点。中国专利CN102539791A公开了一种总胆汁酸的定量测定及测定试剂盒，其中，提供了一种以酶学方法定量测定人血清样品中总胆汁酸含量的试剂，该试剂由分别放置的溶液型试剂1和试剂2两部分组成，其中，所述试剂1中含有氧化型β-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，缓冲剂和稳定剂；试剂2中含有还原型辅酶I和羟类固醇脱氢酶以及稳定剂和缓冲剂，具有灵敏度高、成本低、操作简便快速、易于推广的优点。但上述专利中的试剂对于甘胆酸的检测试剂在测定时均存在准确度低以及重复性、稳定性差的问题。

针对现有技术中甘胆酸测定存在的检测试剂在测定时均存在的准确度低以及重复性、稳定性差等问题，亟需寻找一种准确度、稳定性高，线性范围广且重复性好的测定试剂，。

发明内容

本发明针对现有技术存在的问题，提供了一种甘胆酸的测定试剂及其制备方法，该测定试剂准确度、稳定性高，线性范围广且重复性好。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明提供了一种甘胆酸的测定试剂，包括R1试剂、R2试剂和甘胆酸标准样；

所述R1试剂包括：硫代氧化型辅酶I、缓冲液和羟基乙叉二膦酸；

所述R2试剂包括：还原型辅酶I、缓冲液、甘胆酸脱氢酶、叠氮钠、乙醇、卵磷脂和丁基羟基茴香醚；

所述甘胆酸标准样包括：甘胆酸钠水合物、缓冲液和叠氮钠。

进一步地，所述R1试剂包括：1-1.5g/L硫代氧化型辅酶I、0.5-0.8mmol/L缓冲液和3-6g/L羟基乙叉二膦酸。

优选地，所述R1试剂包括：1.2g/L硫代氧化型辅酶I、0.65mmol/L缓冲液和5g/L羟基乙叉二膦酸。