[发明专利]一种甘胆酸的测定试剂及其制备方法有效
| 申请号： | 202110293702.3 | 申请日： | 2021-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN112881370B | 公开（公告）日： | 2021-11-26 |
| 发明（设计）人： | 方朝君;李光星 | 申请（专利权）人： | 浙江达美生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/77 | 分类号： | G01N21/77;G01N21/31 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 尉月丽 |
| 地址： | 312000 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 胆酸 测定 试剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种甘胆酸的测定试剂，其特征在于：包括R1试剂、R2试剂和甘胆酸标准样；
所述R1试剂包括：1-1.5g/L硫代氧化型辅酶I、0.5-0.8mmol/L缓冲液和3-6g/L羟基乙叉二膦酸；
所述R2试剂包括：6-7g/L还原型辅酶I、0.5-0.8mmol/L缓冲液、5000-8000U/L甘胆酸脱氢酶、0.5-0.7mmol/L叠氮钠、10-15mL/L乙醇、0.08-0.12g/L卵磷脂和0.05-0.15g/L丁基羟基茴香醚；
所述甘胆酸标准样包括：甘胆酸钠水合物、缓冲液和叠氮钠；
R1试剂中所述的羟基乙叉二膦酸、R2试剂中所述的卵磷脂与R2试剂中所述的丁基羟基茴香醚的重量比为3-6:0.08-0.12:0.05-0.15；
R1试剂中所述缓冲液和羟基乙叉二膦酸的用量比为0.5-0.8mmol:3-6g。
2.根据权利要求1所述的测定试剂，其特征在于：所述甘胆酸标准样包括：6-9g/L甘胆酸钠水合物、0.5-0.8mmol/L缓冲液和0.5-0.7mmol/叠氮钠。
3.根据权利要求1所述的测定试剂，其特征在于：所述缓冲液为磷酸盐缓冲液和/或三羟甲基氨基甲烷。
4.根据权利要求1所述的测定试剂，其特征在于：所述硫代氧化型辅酶I为β-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸氧化型。
5.根据权利要求1所述的测定试剂，其特征在于：所述还原型辅酶I为β-烟酰胺脲嘌呤二核苷酸还原型。
6.如权利要求1-5任一项所述的测定试剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)R1试剂配制：向纯水中加入缓冲液，搅拌至溶解后，依次加入羟基乙叉二膦酸以及硫代氧化型辅酶I，搅拌至溶解后，定容，得到R1试剂；
(2)R2试剂配制：向纯水中加入缓冲液，搅拌至溶解后，依次加入甘胆酸脱氢酶、叠氮钠、溶解于乙醇中的卵磷脂、丁基羟基茴香醚和还原型辅酶I，搅拌至溶解后，定容，得到R2试剂；
(3)甘胆酸标准样配制：向纯水中加入甘胆酸钠水合物，搅拌至溶解后，依次加入缓冲液和叠氮钠，搅拌至溶解后定容，得到甘胆酸标准样。
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