[发明专利]人外周血T淋巴细胞的处理方法及免疫原制剂和应用

权利要求书

1.一种人外周血T淋巴细胞处理方法，其特征在于，包括如下步骤：

收集白细胞滤盘中的白细胞，采用淋巴细胞分离液处理所述白细胞，离心后吸取白膜层，采用PBS缓冲液进行重悬，离心重复洗涤，获得分离纯化的单个核细胞；

收集经活性鉴定合格的单个核细胞，进行批量冻存；

将所述经活性鉴定合格的单个核细胞进行增殖培养，所述增殖培养采用含CD3单抗、IL-2、IGF-1以及Human serum albumin（HSA）的RPMI1640 nonessential amino acids培养基，获得活性大于90%且不掺杂红细胞和血小板的T淋巴细胞。

2.一种T淋巴细胞免疫原制剂，其特征在于，为主要由矿物油佐剂、分子佐剂和按照权利要求1的处理方法制备获得的T淋巴细胞混合制备而成的水包油抗原制剂。

3.权利要求2所述的T淋巴细胞免疫原制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

将权利要求1制备获得的T淋巴细胞作为抗原，无菌条件下将抗原和矿物油佐剂按照质量比1:1混匀，再加入分子佐剂，震荡形成水包油抗原制剂。

4.一种经权利要求1所述的人外周血T淋巴细胞处理方法获得的高活性T淋巴细胞或者权利要求2所述的T淋巴细胞免疫原制剂在生产抗人T细胞免疫蛋白中的应用。

5.一种含抗人T细胞免疫蛋白的抗血清的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：

采用权利要求2所述的T淋巴细胞免疫原制剂颈侧肌注免疫健康猪，免疫程序为1次基础免疫和2次加强免疫，免疫时间间隔为21~28天，于第2次加强免疫后的第9~14天收集含抗人T细胞免疫蛋白的抗血浆。

6.根据权利要求5所述的含抗人T细胞免疫蛋白的抗血清的生产方法，其特征在于，还包括对所述抗血浆进行抗体效价分析的步骤。

7.一种抗人淋巴细胞免疫蛋白的生产方法，其特征在于，以白细胞滤盘收集的白细胞为原料，利用权利要求5的生产方法获得的抗血清，分离，纯化，获得抗人淋巴细胞免疫蛋白。