[发明专利]一种苍术原料药真伪快速鉴别方法

说明书

本发明公开了一种苍术原料药真伪快速鉴别方法，主要基于超高效液相色谱‑四级杆飞行时间串联质谱(ultra performance liquid chromatography‑quadrupole‑time of flight‑mass spectrometry，UPLC‑Q‑TOF‑MS)技术，通过苍术共有化合物数据库对待测样品进行筛查而实现鉴别目的。所述鉴别方法包括以下步骤：1)样品前处理：称取适量粉碎样品，75％乙醇溶解，超声提取，取上清液经微孔滤膜过滤，制得样品溶液；2)采集数据：样品溶液经超高效液相色谱分离和高分辨质谱检测，采集样品溶液的色谱和质谱数据；3)数据库筛查：将样品的色谱和质谱数据导入到筛查软件中，使用苍术共有化合物数据库对样品数据进行高通量筛查，若筛查到全部的共有化合物，则说明该样品是真品苍术，否则为伪品苍术。该苍术原料药鉴别方法方便快捷、准确性高，可实现苍术原料药的科学性、准确性检测需求，提高市场监管力度。

技术领域

本发明涉及一种苍术原料药真伪快速鉴别方法，尤其是涉及一种基于UPLC-Q-TOF-MS技术通过数据库筛查的苍术原料药真伪快速鉴别方法。

背景技术

苍术为菊科植物茅苍术Atractylodes lancea(Thunb.)DC.或北苍术Atractylodes chinensis(DC.)Koidz.的干燥根茎，性辛、苦、温，归脾、胃、肝经，具有燥湿健脾、祛风散寒的功效，是中国古代防疫的重要药材之一。现代药理研究也证实，苍术确有抗球菌、杆菌、真菌和病毒的功效。自新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019，COVID-19)爆发以来，苍术被广泛应用于COVID-19治疗中，多次出现在《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第八版)》中医辨证治疗处方中。因此，对苍术原料药进行鉴别意义重大，其品种的真伪、质量的优劣直接影响到临床用药的安全有效性。

目前，苍术原料药的鉴别主要有性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别和高效液相色谱鉴别等方法。性状鉴别主要是观察药材形状、大小、色泽、表面、质地、断面、气、味等特征；显微鉴别为取药材粉末滴加水合氯醛溶液透化在显微镜下观察细胞分子及内含物等特征；薄层色谱鉴别主要是通过薄层色谱斑点的有无进行药品真伪的判断，通过斑点的大小及颜色进行药品品质的分析；高效液相色谱鉴别则通过检测苍术特征成分含量高低来实现鉴别目的。然而以上鉴别方法均较为片面，往往需要鉴别者具备丰富的中药鉴别经验，主观性较大，无法对苍术原料药开展科学鉴别。因此，亟需一种方便快捷、准确性高的鉴别方法，为苍术原料药真伪鉴别、质量评价与控制提供科学依据。

发明内容

本发明提供一种苍术原料药真伪快速鉴别方法，包括以下步骤：

a)样品前处理：称取适量粉碎样品，75％乙醇溶解，超声提取，取上清液经微孔滤膜过滤，制得样品溶液；

b)采集数据：样品溶液经超高效液相色谱分离和高分辨质谱检测，采集样品溶液的色谱和质谱数据；

c)数据库筛查：将样品的色谱和质谱数据导入到筛查软件中，使用苍术共有化合物数据库对样品数据进行高通量筛查，若筛查到全部的共有化合物，则说明该样品是真品苍术，否则为伪品苍术。

其中，样品前处理方法为：取苍术样品，粉碎后过四号筛，取适量粉末于50mL具塞离心管中，加入适量75％乙醇，涡旋混匀，超声30min，取上清液过0.22μm滤膜，即得样品溶液。

液相色谱分离条件为：色谱柱选用规格为100mm×2.1mm，1.8μm的AcquityHSS T3色谱柱；柱温为45℃；流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈，梯度洗脱；梯度洗脱的条件为0～10.0min，流动相A为90％→70％；10.0～30.0min，流动相A为70％→50％；30.0～40.0min，流动相A为50％→10％；40.0～53.0min，流动相A为10％；53.0～55.0min，流动相A为10％→90％；55.0～60.0min，流动相A为90％；流速为0.5mL/min；进样量为5uL。