[发明专利]一种多酶级联转化L-酪氨酸生产酪醇的方法有效
申请号: | 202110292484.1 | 申请日: | 2021-03-18 |
公开(公告)号: | CN113025546B | 公开(公告)日: | 2023-06-13 |
发明(设计)人: | 吴静;阮小波;刘佳;宋伟;陈修来;高聪 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/04;C12N9/80;C12N9/88;C12P7/22;C12R1/19 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 林娟 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 级联 转化 酪氨酸 生产 方法 | ||
1.一种高效生产酪醇的重组大肠杆菌,其特征在于,双质粒表达系统表达L-氨基酸脱氨酶、丙酮酸脱羧酶、醇脱氢酶和葡萄糖脱氢酶;
所述L-氨基酸脱氨酶和丙酮酸脱羧酶位于pETDuet-1质粒上,醇脱氢酶和葡萄糖脱氢酶位于pACYCDuet-1质粒上;用pETDuet-1质粒表达两个拷贝的丙酮酸脱羧酶基因;所述L-氨基酸脱氨酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述丙酮酸脱羧酶的氨基酸序列如SEQID NO.3所示;所述醇脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示;所述葡萄糖脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。
2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌,其特征在于,所述大肠杆菌为
3.一种全细胞催化剂,其特征在于,含有权利要求1或2所述重组大肠杆菌。
4.一种生产酪醇的方法,其特征在于,应用权利要求1或2所述重组大肠杆菌或权利要求3所述全细胞催化剂进行转化生产,将L-酪氨酸转化为酪醇。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述转化的体系包括20~30 g/L L-酪氨酸,1.5~2.5 mmol/L 辅酶焦磷酸硫胺素TPP,3~7 mmol/L 七水硫酸镁,0.4~0.6 mmol/LNADP+,20~30 g/L 葡萄糖。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述转化的pH为7~8,转化的温度为20~30℃。
7.权利要求1或2所述重组大肠杆菌或权利要求3所述全细胞催化剂在制备酪醇中的应用。
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