[发明专利]产果胶酶芽孢杆菌及其发酵方法、以及胡椒脱皮的方法

说明书

本发明公开一种产果胶酶芽孢杆菌及其发酵方法、以及胡椒脱皮的方法，涉及食品加工技术领域。所述产果胶酶芽孢杆菌的分类命名为农研所芽孢杆菌(Bacillus niabensis)YY01，保藏编号为CCTCC M2021224，保藏时间为2021年3月12日。本发明旨在提供一种农研所芽孢杆菌YY01，所述农研所芽孢杆菌YY01可以发酵产生耐热性好的果胶酶，且该果胶酶对胡椒的脱皮效果较好，采用农研所芽孢杆菌YY01发酵产生的果胶酶用于胡椒脱皮与传统的胡椒酶法脱皮(将现有的果胶酶和纤维素酶联用)相比，成本更低，降低了胡椒生产成本。

技术领域

本发明涉及食品加工技术领域，特别涉及一种产果胶酶芽孢杆菌及其发酵方法、以及胡椒脱皮的方法。

背景技术

果胶主要是由D-吡喃半乳糖醛酸通过α-1,4糖苷键连接组成的长链状多糖聚合物，通常以部分以甲酯化状态存在，其分子量为一到四十万不等。天然果胶类物质以原果胶、果胶、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中，是细胞壁中形成初级细胞壁和胞间层的一种结构性多糖，它们通常伴随纤维素而存在，构成相邻细胞中间层粘结物，有助于增强细胞壁的机械强度和改善物理性能，使植物的细胞能够紧紧的粘连在一起。

果胶酶是指所有能催化果胶分解的复合酶。果胶酶能分解聚半乳糖醛酸的α-1,4糖苷键，将其降解为不饱和低聚半乳糖醛酸。基于此，果胶酶被广泛应用于食品加工、饮料加工、纺织工业、畜牧业以及造纸行业等领域。

我国直到上个世纪八十年代的早期，才逐渐有学者开始研究果胶酶。目前使用最广泛，成功商业化的是黑曲霉所产生的果胶酶，现在，大多数商业化酶制剂都是由黑曲霉生产的。但黑曲霉生产的果胶酶的耐热性较差，从而限制了果胶酶的应用范围，虽然将黑曲霉的基因修饰后再导入毕赤酵母中表达，可以获得热稳定性高的果胶酶，但这无疑增加了果胶酶的生产成本。

因此，为了提高果胶酶产品的品种、产量和稳定性，必须找到并筛选出新的性能优良的菌株。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种产果胶酶芽孢杆菌及其发酵方法、以及胡椒脱皮的方法，旨在提供一种农研所芽孢杆菌YY01，该农研所芽孢杆菌YY01 可以产生耐热的果胶酶。

为实现上述目的，本发明提出一种产果胶酶芽孢杆菌，所述产果胶酶芽孢杆菌已被送至中国典型培养物保藏中心保藏，地址：中国武汉武汉大学，分类命名为农研所芽孢杆菌(Bacillus niabensis)YY01，其保藏编号为CCTCC NO: M2021224，保藏时间为2021年3月12日。

可选地，所述农研所芽孢杆菌YY01的16S RNA的基因序列如SEQ ID NO：1所示。

此外，本发明还提出一种产果胶酶芽孢杆菌的发酵方法，所述产果胶酶芽孢杆菌的发酵方法包括如下步骤：

采用如上所述的农研所芽孢杆菌YY01为出发菌株，依次经种子培养、摇瓶发酵，得果胶酶粗酶液。

可选地，所述种子培养时，采用的液体培养基为无机盐果胶培养基。

可选地，所述摇瓶发酵时，采用的发酵培养基包括以下组分：K₂HPO₄ 2.0 g/L、果胶2.0-4.0g/L、(NH₃)₂SO₄ 1.5g/L、MgSO₄ 0.5g/L、FeSO₄ 0.01g/L， pH7.2～7.4。

可选地，采用如上所述的农研所芽孢杆菌YY01为出发菌株，依次经种子培养、摇瓶发酵，得果胶酶粗酶液的步骤之前还包括以下步骤：

取土壤样品加无菌水，于28～30℃、180～240r/min摇床孵育24h，制成质量浓度为10～12％的土壤悬液，备用；

取所述土壤悬液的上清液梯度稀释成不同浓度的多个稀释液；