[发明专利]一种植物中氯虫苯甲酰胺的检测方法

权利要求书

1.一种柑橘水果中氯虫苯甲酰胺的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1提取：取待测试样，加入萃取助剂和有机酸的乙腈溶液，振荡均匀，超声不少于8min，以不低于7000转/分钟的转速一次离心不少于8min，取一次离心上清液，制得萃取液；所述步骤S1各原料重量配比为：待测试样：萃取助剂：有机酸的乙腈溶液=1：（0.4-0.6）：（0.6-1）；所述有机酸的乙腈溶液中有机酸的质量浓度为0.8-1.2%；

S2净化：将萃取液加入含有PSA、C18和GCB的QuEChERS净化管中，振荡均匀，以不低于7000转/分钟的转速二次离心不少于8min，取二次离心上清液，于38-42℃水浴氮气吹干，加入1mL初始流动相溶解，过滤，取滤液，制得净化液；所述步骤S2各原料重量配比为：萃取液100份，PSA大于1.5份，C18大于1.5份，GCB大于0.6份；

S3上机检测：将净化液注入液相色谱柱进行LC-MS联检，洗脱，测出峰面积，计算氯虫苯甲酰胺含量；

所述有机酸为甲酸与山梨酸按（0.8-1.2）:1的重量比组成的混合酸；

所述萃取助剂为氯化钠和硫酸镁按（0.7-0.9）:1的重量比组成的混合盐。

2.根据权利要求1所述的柑橘水果中氯虫苯甲酰胺的检测方法，其特征在于：所述步骤S3取氯虫苯甲酰胺标准品，加初始流动相分别配制成氯虫苯甲酰胺浓度为5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL和100ng/mL的氯虫苯甲酰胺标准溶液；将净化液和氯虫苯甲酰胺标准溶液分别注入液相色谱柱进行LC-MS联检，测出峰面积，绘制标准曲线，计算氯虫苯甲酰胺含量。

3.根据权利要求2所述的柑橘水果中氯虫苯甲酰胺的检测方法，其特征在于：所述初始流动相为复合水溶液与乙腈按8:2的体积比组成的混合液，所述复合水溶液中含有浓度为2mmol/L的甲酸铵和浓度为1wt%的甲酸。

4.根据权利要求1所述的柑橘水果中氯虫苯甲酰胺的检测方法，其特征在于：所述步骤S3中，色谱柱为BEH C18色谱柱，规格为1.7×100mm，粒径为2.1μm；柱温为35℃。

5.根据权利要求1所述的柑橘水果中氯虫苯甲酰胺的检测方法，其特征在于，所述步骤S3检测条件为：检测方式为MRM多离子监测；特征离子：定量离子为484/285.7，定性离子为484/452.7和484/177；离子源为电喷雾离子源ESI+；毛细管电压为3000V；去溶剂温度为450℃；进样体积为1μL。

6.根据权利要求3所述的柑橘水果中氯虫苯甲酰胺的检测方法，其特征在于，所述步骤S3中洗脱方式采用梯度洗脱，梯度洗脱比例如下：检测时间为0.01min时，流速为0.3mL/min，流动相为复合水溶液与乙腈按8:2的体积比组成的混合液；检测时间为0.5min时，流速为0.3mL/min，流动相为复合水溶液与乙腈按8:2的体积比组成的混合液；检测时间为1.5min时，流速为0.3mL/min，流动相为复合水溶液与乙腈按5:5的体积比组成的混合液；检测时间为4.5min时，流速为0.3mL/min，流动相为复合水溶液与乙腈按5:5的体积比组成的混合液；检测时间为5min时，流速为0.3mL/min，流动相为复合水溶液与乙腈按8:2的体积比组成的混合液；检测时间为5.5min时，流速为0.3mL/min，流动相为复合水溶液与乙腈按8:2的体积比组成的混合液。

7.根据权利要求1所述的柑橘水果中氯虫苯甲酰胺的检测方法，其特征在于：所述步骤S1取10g，精确至0.001g，待测试样加入至50mL离心管中，加入5g萃取助剂和10mL有机酸的乙腈溶液，振荡均匀，超声，一次离心，取一次离心上清液，制得萃取液；所述步骤S2取2mL萃取液加入至QuEChERS净化管中，QuEChERS净化管中含有900mg的MgSO4、150mg的GCB、150mg的PSA和25mg的C18，振荡均匀，二次离心，氮气吹干，加入1ml初始流动相溶解，过0.22μm滤膜，制得净化液。

8.根据权利要求1所述的柑橘水果中氯虫苯甲酰胺的检测方法，其特征在于：所述待测试样为柑橘水果经粉碎至20目制得的试样。