[发明专利]通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞及其制备方法和应用在审
申请号: | 202110279010.3 | 申请日: | 2021-03-16 |
公开(公告)号: | CN113005094A | 公开(公告)日: | 2021-06-22 |
发明(设计)人: | 经纬;樊克兴;金钢 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军海军军医大学第一附属医院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/62;C07K19/00;A61K39/00;A61P35/00 |
代理公司: | 北京细软智谷知识产权代理有限责任公司 11471 | 代理人: | 刘静荣 |
地址: | 200082 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通用型 嵌合 抗原 受体 修饰 细胞 及其 制备 方法 应用 | ||
1.通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞,其特征在于,所述T细胞来源于人或动物的脐血。
2.根据权利要求1所述的通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞,其特征在于,所述T细胞通过对人或动物的脐血进行梯度密度离心、流式分选或免疫磁珠分选方法分离得到。
3.根据权利要求1所述的通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞,其特征在于,所述嵌合抗原受体由CD8α信号肽、MesoscFv、人CD8α铰链区、人CD8α跨膜区、4-1BB胞内信号区和免疫受体络氨酸活化基序CD3ζ依次拼接构成。
4.根据权利要求1所述的通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞,其特征在于,所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
5.根据权利要求1所述的通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞,其特征在于,编码所述嵌合抗原受体的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
6.权利要求1所述的通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
(1)构建含编码嵌合抗原受体基因的慢病毒表达载体;
(2)制备病毒溶液;
(3)用病毒溶液转染脐血来源的T细胞,得到通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞。
7.根据权利要求6所述的通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞的制备方法,其特征在于,所述脐血来源的T细胞由包括以下步骤的方法制备得到:
(a)将脐带血和等体积的淋巴细胞分离液混合,进行离心分离,得到单个核细胞;
(b)对单个核细胞进行分选,以获得T细胞;
(c)在培养袋中对分离得到的T细胞进行诱导培养,得到脐血来源的活化扩增的T细胞。
8.根据权利要求7所述的通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞的制备方法,其特征在于,步骤(a)中,将脐带血和等体积的淋巴细胞以800G离心力,转动15min-30min。
9.权利要求1所述的通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞的应用。
10.权利要求1所述的通用型嵌合抗原受体修饰的T细胞在制备抗肿瘤药物和/或预防肿瘤药物中的应用。
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