[发明专利]同时测定鱼肉中十六种全氟烷基化合物的方法

说明书

本发明提供一种同时测定鱼肉中16种全氟烷基化合物的方法，包括：样品经1％甲酸‑乙腈溶液超声提取，通过式m‑PFC固相萃取柱净化，氮气浓缩至1mL后，以C18色谱柱进行分离，甲醇‑5mmol/L乙酸铵溶液进行梯度洗脱。16种目标物在13min内均可实现良好分离，各物质的精确质量数偏差均小于2.83×10‑6，在0.10～20.0μg/L线性范围内，相关系数均大于0.990，方法的检出限为0.015～0.05μg/kg。在0.50、2.0和5.0μg/kg的基质加标水平下，平均回收率为70.7％～110.1％，相对标准偏差为0.5％～12.8％。该方法操作简单快速、准确度高、灵敏度高。

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，具体涉及一种超高效液相色谱-高分辨质谱法同时测定鱼肉中16种全氟烷基化合物。

背景技术

全氟烷基化合物(Perfluorinated alkylated substances，PFASs)是一类人工合成的具有多种应用价值的含氟有机物，因其良好的化学稳定性、耐热性、疏水疏油性及高表面活性等特性，被广泛应用于纺织品、皮革保护剂、纸张涂料、农药和灭火泡沫等领域。随着PFASs的大规模生产和使用，排放到自然环境中的PFASs逐年增多，水、底泥等环境介质和生物体中均检出PFASs。研究表明，PFASs可通过食物链逐级放大并蓄积在人或动物体内，从而产生多种毒性效应，甚至可导致器官衰竭或癌变。2009年，全氟辛烷磺酸及其盐类、全氟辛基磺酰氟均被列入斯德哥尔摩公约附件B中，并限制其在全球范围内使用。鱼及其它水产品是人类膳食的重要组成部分，据报道，当人类食用被PFASs污染的鱼后，血液中PFASs的浓度含量明显增加，对人体健康构成潜在威胁。2010年欧盟委员会发布2010/161/EU号议案，建议开展鱼、肉等各类动物源性食品中PFASs的监测行动。因此，建立快速、灵敏、准确地测定鱼肉中多种PFASs的分析方法，可积极推进此项监测工作。

目前，检测PFASs的方法主要有酶联免疫法(ELISA)、荧光光谱法、气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)等。其中LC-MS/MS法，具有灵敏度高、重现性好、抗干扰性强等特点，是目前分析PFASs的主要检测技术。近年来迅速发展起来的液相色谱-高分辨质谱(LC-HRMS)技术，其分辨率可达140000，能获取目标物的精确质量数，且质量偏差在0.1～1.0×10^-6之间，定性准确度高，可在无标准品的情况下实现目标物及性质相近化合物的定性筛查和回顾性分析。同时，LC-HRMS兼具良好的分析能力和高灵敏度，为痕量或更低水平PFASs检测提供了新的技术手段。

鱼肉样品基质具有蛋白质含量高、脂肪和磷脂等杂质干扰多的特点，快速高效的前处理是实现准确分析的关键。目前，对鱼肉中PFASs多残留检测的前处理方法主要有碱消解法、离子对萃取法、固相萃取法、和QuEChERS法等。碱消解法，主要通过加入NaOH溶液进行消解，其过程与酶解类似，耗时长；离子对萃取法是使用离子对试剂结合甲基叔丁基醚进行震荡提取，该方法需剧烈振荡1h才能将离子对试剂充分离子化，分析时间长，通量低；固相萃取法作为传统的分析技术，采用固相萃取装置结合WAX固相萃取柱可有效去除鱼肉蛋白质、磷脂等物质，但方法操作繁琐、耗时且成本高；QuEChERS方法，最初由美国农业部Anastassiades教授开发的用于检测农产品中农药残留的前处理技术，该方法具有简单、快速、高效、绿色等优点，现已广泛应用于其他污染物的痕量分析。基于QuEChERS法改良优化的快速滤过型净化法(m-PFC)，是一种通过式净化法，样品提取液可直接通过净化柱实现一步净化。其净化柱是由一定比例的十八烷基硅烷键合硅胶(C₁₈)、乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)和多壁碳纳米管(MWCNTs)吸附材料填充而成。与传统QuEChERS方法相比，净化可一步完成，无需活化、清洗、洗脱和单独称量吸附剂，前处理效率高，已逐渐在果蔬、茶叶和血液等样品中有机污染物分析得以应用。而以快速滤过净化法(m-PFC)结合高分辨质谱分析鱼肉等生物组织样品中多种PFASs的研究较少。

发明内容