[发明专利]一种黄花蒿内生真菌来源的环肽化合物及其作为抗肿瘤药物的应用

说明书

本发明涉及一种黄花蒿内生真菌来源的环肽化合物及其作为抗肿瘤药物的应用。所述环肽化合物具有式I所述结构：

技术领域

本发明属于天然产物领域，具体涉及一种黄花蒿内生真菌来源的环肽化合物及其作为抗肿瘤药物的应用。

背景技术

癌症是一个重大公共卫生问题，已成为全球第二大死亡原因，仅次于心脑血管疾病。自20世纪40年代，临床上应用第一个抗肿瘤药物--氮芥成功治疗恶性淋巴瘤以来，化学抗肿瘤药物的研究已取得巨大的发展，但对危害人类生命健康最严重的、占恶性肿瘤90％以上的实体瘤还缺乏有效治疗药物。耐药性和恶性肿瘤侵袭/转移是当前化疗药物面临的重大挑战，越来越多的研究致力于开发新颖的化疗药物。尽管现代组合化学与高通量药物筛选技术交叉结合加快了抗肿瘤新药的研制，但从天然产物中寻找抗肿瘤活性先导化合物仍然是发现新药的主要途径。

与非选择性地同时抑制正常和肿瘤组织细胞生长的传统小分子化疗药物相比，天然肽类化合物具有无可比拟的性质：其通常含有5～50个氨基酸残基，易于化学合成和修饰；一些选择性活性肽常表现出最小的脱靶效应；天然活性肽常见多靶点作用机制，能抵抗某些方式的耐药性。天然肽类化合物已成为化疗药物的新兴来源，在临床中表现出抗耐药和广谱抗肿瘤活性的优势。一些活性肽化合物及其衍生物因其显著的抗肿瘤作用进入临床试验，而Polatuzumab、Plitidepsin等的成功上市预示着将有更多活性肽化合物成为有效化疗药物或药物先导物。

发明内容

本发明提供一种式I结构的环肽化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于式I结构如下：

本发明的另一实施方案提供一种制备上述式I化合物的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将真菌Myrothecium roridum IFB-E091接入PD培养基中，于28℃、140rpm摇床培养5-7天，得种子液；

(2)将步骤(1)培养的真菌Myrothecium roridum IFB-E091进行发酵培养；将步骤(1)得到的种子液接种于固体发酵培养基中，于28-30℃静置培养28-30天，得固体发酵产物；

(3)将步骤(2)得到的固体发酵产物粉碎阴干后用体积比1:1的氯仿/甲醇混合溶剂浸提2-3次，合并浸提液后减压浓缩得到发酵产物浸膏；

(4)步骤(3)得到的发酵产物浸膏经色谱分离即得式I化合物。

步骤(1)所述PD培养基的制备方法为：去皮马铃薯200g，切碎成丁，加水煮沸30min，以纱布滤去残渣，滤液加水补足至1000mL，加20g葡萄糖溶解，分装，121℃灭菌20min，备用；培养条件为：旋转式摇床，28℃，140rpm，培养5-7天。

步骤(2)所述固体发酵培养基的配方为：15mL水、7.5g小米、7.5g麸皮、0.5g酵母膏、0.1g酒石酸钠、0.1g谷氨酸钠、0.01g绿矾和0.1mL玉米油。

步骤(4)中所述色谱分离为本领域常规的色谱分离方法，优选正相硅胶柱层析、反相硅胶柱层析、凝胶柱层析、HPLC制备中的一种或几种组合。此处所述一种或几种组合，包括同一分离手段的重复使用。所述色谱分离进一步优选将发酵产物浸膏先经正相硅胶柱层析，用氯仿/甲醇梯度洗脱(v/v 100:0→0:100)，得到8个极性组分Fr.1～Fr.8；其中Fr.5组分再经正相硅胶柱层析，用氯仿/甲醇梯度洗脱(v/v 100:0→100:30)得到6个组分Fr.5-1～Fr.5-6；其中Fr.5-3组分经HPLC制备即得式I化合物。其中HPLC制备条件为：HITACHIPrimaide高效液相色谱仪，Sinochrom ODS-AP液相色谱柱(4.6×250mm，5μm)，波长254nm，流动相为甲醇:水(v/v)＝85:15,流速为1mL/min。