[发明专利]一种促进谷氨酸棒状杆菌生产L-苹果酸的方法

权利要求书

1.一种促进谷氨酸棒状杆菌生产L-苹果酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，取谷氨酸棒状杆菌，接种到种子培养基中进行培养；所述种子培养基包括葡萄糖，蛋白胨，酵母粉，氯化钠；

S2，将种子液接种到发酵培养基中，并加入碳源和氮源，得到发酵液；

S3，将发酵液稀释，利用高效液相色谱进行L-苹果酸的测定。

2.如权利要求1所述的一种促进谷氨酸棒状杆菌生产L-苹果酸的方法，其特征在于，步骤S1中，培养温度为30℃，pH值为7.0，培养时间为8-16h。

3.如权利要求1所述的一种促进谷氨酸棒状杆菌生产L-苹果酸的方法，其特征在于，步骤S2中，所述发酵培养基为硫酸铵培养基、NaAce培养基和CGXⅡ培养基中的一种。

4.如权利要求3所述的一种促进谷氨酸棒状杆菌生产L-苹果酸的方法，其特征在于，所述硫酸铵培养基由以下组分组成：葡萄糖50g/L，NaAce 5g/L，KH₂PO₄ 1.5g/L，MgSO₄·7H₂O0.5g/L，(NH₄)₂SO₄ 5g/L，CaCl₂ 0.2g/L；

NaAce培养基由以下组分组成：葡萄糖20g/L，NaAce 5g/L，KH₂PO₄ 0.75g/L，K₂HPO₄0.75g/L，(NH₄)₂SO₄ 5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，CaCl₂ 0.2g/L，MnSO₄·4H₂O 0.02g/L，FeSO₄·7H₂O 0.005g/L，维生素H 0.2mg/L，维生素B1 0.2mg/L；

CGXⅡ培养基由以下组分组成：(NH4)₂SO₄ 20g/L,尿素5g/L,KH₂PO₄ 1g/L,K₂HPO₄ 1g/L，葡萄糖40g/L，MOPES 42g/L，原儿茶酸0.03mg/L，生物素0.2mg/L，含微量元素的组合物；

所述含微量元素的组合物包括：MgSO₄·7H₂O 0.25g/L，CaCl₂ 10mg/L，FeSO₄·7H₂O10mg/L,MnSO₄·7H₂O 10mg/L，ZnSO₄·7H₂O 1mg/L，CuSO₄ 0.2mg/L，NiCl₂·6H₂O 0.02mg/L。

5.如权利要求1所述的一种促进谷氨酸棒状杆菌生产L-苹果酸的方法，其特征在于，步骤S2中，碳源为葡萄糖和碳酸氢钾，所述碳酸氢钾的浓度为20-60g/L；葡萄糖的浓度为20-100g/L。

6.如权利要求1所述的一种促进谷氨酸棒状杆菌生产L-苹果酸的方法，其特征在于，步骤S2中，所述氮源为硫酸铵和/或尿素，所述氮源的浓度为0.38mol/L。

7.如权利要求1所述的一种促进谷氨酸棒状杆菌生产L-苹果酸的方法，其特征在于，步骤S2中，碳氮比为0.9：1。