[发明专利]一种应用于抑制细胞内脂质积累的多肽及其合成方法

说明书

本发明属于生物多肽的技术领域，具体涉及一种应用于抑制细胞内脂质积累的多肽及其合成方法。所述多肽的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示，所述多肽具有较高的靶标亲和力，活性高，在很低的剂量和浓度下即可表现出显著的高活性，通过发挥竞争凝集素，抑制凝集素与甾醇O‑酰基转移酶结合，降低甾醇O‑酰基转移酶活性，达到控制生物体内生理代谢功能，如缓解脂质在肝细胞中的积累，对抗肿瘤发生以及协助抗癌药物抑制肿瘤生长等；所述多肽的合成工艺简单，多肽分子量小，人工合成的效率高，通过固相合成法，大大的减轻了每步产品纯化的难度，过程自动化，易于控制，成本低。

技术领域

本发明属于生物多肽的技术领域，具体涉及一种应用于抑制细胞内脂质积累的多肽及其合成方法。

背景技术

随著经济发展，非酒精脂肪肝病已经成为世界上最常见的肝病，根据流行病学统计，非酒精脂肪肝病患者约占全球人口的25%。特别是在经济发达国家，如美国，约有30%～40%成年人患有非酒精脂肪肝病，在2016年，非酒精脂肪肝病给美国造成的年度经济损失大约有1030亿美元。非酒精脂肪肝病是一种由代谢综合症引起慢性肝脏疾病，主要特征为肝脏细胞大量累积脂肪，虽然早期可通过控制饮食及规律运动缓解甚至逆转病理进程，但大多数患者没有达到或维持饮食目标和体重减轻，并随着脂质积累的不断增加，肝损伤加剧，非酒精性肝病可发展为肝炎、肝硬化甚至肝癌，极大地威胁人类生命健康。由于非酒精脂肪肝病早期病征不明显，难以早期发现，因此及时缓解肝脏脂质积累显得尤为必要。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的在于提供一种应用于抑制细胞内脂质积累的多肽及其合成方法，所属多肽具有较高的靶标亲和力，活性高，具有缓解脂质在肝细胞中的积累，对抗肿瘤发生以及协助抗癌药物抑制肿瘤生长的作用。

本发明的技术内容如下：

本发明提供了一种应用于抑制细胞内脂质积累的多肽，所述多肽的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示，其中，氨基酸序列的1-41号肽段为功能肽段，发挥抑制脂肪积累功用；氨基酸序列的42-53号肽段为穿膜肽，协助多肽进入细胞，任何可协助1-41号功能肽段进入细胞的方式，如转基因工艺及携带不同穿膜肽等，都可以达到抑制细胞脂肪积累的作用。

本发明还提供了一种应用于抑制细胞内脂质积累的多肽用于制备多肽药物。

本发明还提供了一种应用于抑制细胞内脂质积累的多肽的合成方法，包括如下步骤：

1）将树脂浸泡于有机溶液中，清洗抽掉有机溶液，用去保护剂去除树脂上的保护基团（脱帽），清洗；

2）取游离羧基端的第2个氨基酸，加入缩合剂、DMF放入以上树脂中反应，之后取树脂进行验色；

3）用去保护剂去除第2个氨基酸上的保护基团（脱帽），清洗；

4）重复步骤2）和步骤3）进行氨基酸的连接，直到最后一个氨基酸；

5）用去保护剂去除最后一个氨基酸上的保护基团（脱帽），清洗，验色；

6）反应结束之后，采用溶液对多肽产物进行洗涤收缩，用裂解液切得到的多肽，最后进行分析和纯化；

步骤1）所述树脂包括Fmoc-lys（boc）Wang resin；

步骤1）所述有机溶液包括DCM二氯甲烷；

步骤1）、步骤3）以及步骤5）所述去保护剂包括胺碱类溶剂，具体包括哌啶、浓氨水、二氧六环/4M NaOH、乙醇胺、环已胺、吗啡啉、吡咯烷酮以及DBU中的一种，优选为20%的哌啶；

步骤1）、步骤3）以及步骤5）所述清洗的试剂为DMF N,N-二甲基甲酰胺；

步骤2）所述验色为茚三酮验色反应，颜色结果为溶液亮黄，树脂透明，无杂色；