[发明专利]基于RAA技术检测I群4型禽腺病毒的引物探针组合及试剂盒

权利要求书

1.一种基于RAA技术检测I群4型禽腺病毒的引物探针组合，引物包括上游引物和下游引物，其特征在于，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示，其中，探针的5′端第23位T碱基标记羧基荧光素，第24位碱基连接脱碱基位点四氢呋喃，第25位碱基标记BHQ1淬灭基团，3′端进行C3-spacer阻断修饰。

2.根据权利要求1所述的基于RAA技术检测I群4型禽腺病毒的引物探针组合，其特征在于，引物探针组合中的引物和探针是以I群4型禽腺病毒特异性Hexon基因为目的基因进行设计获得，其中，所述下游引物的核苷酸序列为对应I群4型禽腺病毒特异性Hexon基因的第1091位碱基前后的核苷酸序列的反向互补序列，且下游引物的核苷酸序列中与I群4型禽腺病毒特异性Hexon基因第1091位碱基对应的碱基设为简并碱基R。

3.根据权利要求1所述的基于RAA技术检测I群4型禽腺病毒的引物探针组合，其特征在于，所述引物探针组合应用在非疾病诊断目的的基于RAA技术检测I群4型禽腺病毒的检测中，且基于RAA技术检测I群4型禽腺病毒的检测方法包括如下步骤：

（1）配置阴性对照、阳性对照以及待检测样品的RAA反应体系，其中，RAA反应体系中所使用的引物探针组合为权利要求1所述的引物探针组合；

（2）RAA反应体系扩增；

（3）根据RAA反应体系的扩增曲线判定待测样品中是否含有I群4型禽腺病毒，待测样品中是否含有I群4型禽腺病毒的判定方式为：

在阴性对照RAA反应体系经扩增反应后无扩增曲线，且阳性对照RAA反应体系经扩增反应后出现扩增曲线的前提下，待检测样品的RAA反应体系扩增反应后具有扩增曲线，则样品为阳性，待检测样品的RAA反应体系扩增反应后无扩增曲线，则样品为阴性。

4.一种基于RAA技术检测I群4型禽腺病毒的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物探针组合。

5.根据权利要求4所述的基于RAA技术检测I群4型禽腺病毒的试剂盒，其特征在于，还包括RAA反应的试剂。