[发明专利]一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法在审
| 申请号： | 202110232616.1 | 申请日： | 2021-02-22 |
| 公开（公告）号： | CN112881571A | 公开（公告）日： | 2021-06-01 |
| 发明（设计）人： | 朱莉;徐红岩;顾秀;刘浩;张亚楠 | 申请（专利权）人： | 江苏沿海化学品检测技术服务有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/74 |
| 代理公司： | 上海浙晟知识产权代理事务所(普通合伙) 31345 | 代理人： | 杨小双 |
| 地址： | 224000 江苏省盐*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高效 色谱 fmoc hyp tbu oh 及其 异构体 手性 检测 方法 | ||
1.一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
将正己烷和0.1％TFA的离子对溶液按一定比例配置流动相A；
将异丙醇和0.1％TFA的离子对溶液按一定比例配置流动相B；
注入待测溶液，以流动相A和流动相B对色谱柱进行等梯度洗脱；
记录色谱图，并采用面积归一化法计算Fmoc-Hyp(tbu)-OH的手性纯度。
2.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法，其特征在于：所述正己烷的体积含量为60～85％，异丙醇的体积含量为15～35％，0.1％TFA的离子对溶液的体积含量均为0.02～1.5％。
3.根据权利要求2所述的一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法，其特征在于：所用色谱柱包括chiralpak IC、chiralcel OD-H、chiralpak IA、chiralpak IB以及Chirobiotic R中的一种或多种。
4.根据权利要求3所述的一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法，其特征在于：所述等梯度洗脱的柱温为20～50℃。
5.根据权利要求1至4所述的任意一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法，其特征在于：所述等梯度洗脱的进样浓度控制在0.25～1.5mg/ml。
6.根据权利要求5所述的一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法，其特征在于：所述等梯度洗脱时紫外线检测器的检测波长为210～240nm。
7.根据权利要求6所述的一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法，其特征在于：所述等梯度洗脱时紫外线检测器的检测波长为220nm。
8.根据权利要求7所述的一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法，其特征在于：所述等梯度洗脱时流动相流速为0.5～1.5ml/min。
9.根据权利要求8所述的一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法，其特征在于：所述等梯度洗脱时流动相流速为0.7ml/min。
10.根据权利要求9所述的一种高效液相色谱法的Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH及其异构体的手性检测方法，其特征在于：所述待测溶液包括Fmoc-L-Hyp(tbu)-OH溶液、异构体Fmoc-D-Hyp(tbu)-OH溶液、异构体Fmoc-L-Cis-Hyp(tbu)-OH溶液和异构体Fmoc-D-Cis-Hyp(tbu)-OH溶液中的一种或多种的结合。
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