[发明专利]一种测定不同产地野生竹节参的挥发性成分的方法

说明书

本发明属于野生竹节参技术领域，公开了一种测定不同产地野生竹节参的挥发性成分的方法，将野生竹节参样品采用顶空固相微萃取处理样品，再结合GC‑MS分析挥发性成分，得到野生竹节参样品的总离子流图。本发明提供的测定不同产地野生竹节参的挥发性成分的方法中，固相微萃取方法简便快捷，传统挥发性成分测定需要将样品磨碎，既费时又费力，可能还会影响真实挥发性成分的准确测定，本发明进行改进，无需将样品磨碎，既省时又省力，而且不影响挥发性成分的准确测定。本发明在相对低温环境下完成萃取的，最大限度的减少了原有挥发性成分的转变与分解，测定结果更准确有效；弥补了传统蒸馏法缺陷，准确测定出对植物气味有重大贡献的低沸点物质。

技术领域

本发明属于野生竹节参技术领域，尤其涉及一种测定不同产地野生竹节参的挥发性成分的方法。

背景技术

目前，竹节参(Panaxjaponicus C.A.Mey.)又名竹节三七、竹节人参、白三七等，为五加科人参属多年生植物，主要分布于陕西、甘肃、安徽、浙江、江西、福建、河南、湖南、湖北、广西、西藏等地，兼具北药人参和南药三七的功效，既补气又补血，被民间誉为“草药之王”，以根茎入药，具有散瘀止血，消肿止痛，祛痰止咳，补虚强壮的功效，提高机体免疫力，延缓衰老，并具有护肝、抗炎、抗疲劳、抗肿瘤等疗效。竹节参主要含有丰富的皂苷类成分，如人参皂苷、竹节参皂苷、伪人参皂苷、竹节人参皂苷甲酯、珠子参苷等。其中皂苷类成分主要为齐墩果烷型三萜皂苷，如人参皂苷有Rg1、Re、Rg2、Rb1、Rb2、Rd等；竹节参皂苷有Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa、竹节参皂苷Ⅴ、竹节参皂苷Ⅴ甲酯、Pjs-1、Pjs-2等；伪人参皂甙有F11，除此之外，还含有丰富的竹节参多糖、氨基酸、挥发油及无机元素等成分。

目前对竹节参在化学成分测定方面研究报道也较多，如关乔中等对鄂西竹节参野生品与栽培品进行了比较研究，发现野生品与栽培品竹节参生药学特征及总皂苷含量存在一定差异，栽培种显著高于野生种；李露等利用HPLC法准确测定了竹节参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rb2、Rg2、Rd的含量。在活性成分提取方面研究也较多，如欧阳丽娜等利用大孔吸附树脂富集纯化提取竹节参皂苷，其最佳提取工艺参数为：上样质量浓度为0.2g生药/m L，以3BV 70％乙醇溶液洗脱，吸附及洗脱体积流量均为1m L/min；欧阳丽娜等还利用微波法提取竹节人参总皂苷，其最佳提取工艺参数为:乙醇体积分数80％,微波功率400W，料液比1:18，提取4次,每次提取5min；向东山等通过正交试验得到了竹节参总皂苷提取的最佳工艺条件：料液比为1∶20，提取4次，每次提取时间40min，提取温度为50℃。

但到目前为止，有关竹节参挥发性成分还极少见报道，仅仅李京华等利用超声波蒸馏法提取竹节参挥发性成分，主要成分是酸、酯和烷烃类，但该方法繁琐，不简便，而且超声波蒸馏法提取过程中使用高温(沸水)，获得的都是高沸点物质，低沸点挥发性物质早已挥发出去，致使结果挥发性成分不全面，此外，高温还会破坏某些物质，导致原有化学成分降解或者转化成其它成分，致使我们所得化学成分并非原有成分，影响实验结果正确性。因此，亟需寻找到一种快速、准确测定竹节参挥发性成分的方法。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：

(1)超声波蒸馏法提取竹节参挥发性成分，方法繁琐，不简便，而且提取过程中使用高温致使结果挥发性成分不全面；

(2)高温会破坏某些物质，导致原有化学成分降解或者转化成其它成分，致使所得化学成分并非原有成分，影响实验结果正确性。

(3)目前大多数植物材料都是研钵研磨碎或者通过液氮研磨碎使得细胞破碎，以利于挥发性成分的挥发，但这可能导致植物挥发性成分的变化，影响实验结果正确性。

解决以上问题及缺陷的难度为：竹节参挥发性成分大多是植物次级代谢产物，含量微少，且不稳定，难以测定，传统的超声波蒸馏法只能测定出高沸点化学成分，低沸点化学成分难以测定出，此外，高温和植物材料的不合理处理(研磨碎)均可能导致挥发性成分的改变。因此，亟需探索出一种对竹节参挥发性成分的快速、准确的方法。