[发明专利]一种模拟尿液基质、稳定剂及在尿液中儿茶酚胺检测方面的应用

说明书

本发明具体涉及一种模拟尿液基质、稳定剂及在尿液中儿茶酚胺检测方面的应用。本发明提供了一种模拟尿液基质及适用于尿液中儿茶酚胺及其代谢物检测的稳定剂。所述模拟尿液基质与正常人尿液空白基质的检测效果接近，相比正常人尿液具有更好的稳定性。所述稳定剂能够降低多种儿茶酚胺类物质的降解程度及玻璃基制品吸附效果。另外，上述模拟尿液基质配合稳定剂可用于儿茶酚胺及其代谢物检测的校准品、质控品制备，制备成为冻干制品后各物质偏差在10％以内，能够稳定保存一年以上。

技术领域

本发明属于儿茶酚胺及其代谢物检测技术领域，具体涉及一种模拟尿液基质及在尿液样品检测中的应用、一种适用于儿茶酚胺的稳定剂及尿液中儿茶酚胺检测的校准品和/或质控品制剂以及一种尿液中儿茶酚胺的检测方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

儿茶酚胺(Catecholamines,CATs)是一类含有二羟基苯基的胺类化合物，是由肾上腺髓质和一些交感神经元嗜铬细胞分泌的一类非常重要的神经递质，也是重要的激素物质。其主要包括肾上腺素(Epinephrine,E)、去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)、多巴胺(Dopamine,DA)。这3种儿茶酚胺经儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)催化分别生成变肾上腺素(Metanephrine,MN)、去甲变肾上腺素(Normetanephrine，NMN)及3-甲氧酪胺(3-Methoxytyramine,3-MT)而失去活性；进一步，肾上腺素、去甲肾上腺素的主要终末代谢产物为香草扁桃酸(Vanillymandelic acid,VMA)，多巴胺的终末代谢产物为高香草酸(Homovanillic acid,HVA)。

儿茶酚胺类物质作为神经递质和激素物质，具有较强的生理学活性，在大脑和神经信号传导中起着重要的作用。血浆和尿液中CAs及其代谢物水平与人体多种生理、病理现象有密切关系，不仅对人体的心血管系统、神经系统、内分泌系统、肾脏、平滑肌组织等的生理活动起着广泛的调节作用，还同时影响人体的代谢。儿茶酚胺类物质，作为维持人体正常运转的重要神经递质，与神经内分泌疾病有重要的相关性。目前，临床上关于儿茶酚胺类及其代谢物质在人体内含量的检测，主要是用于嗜铬细胞瘤或副神经节瘤的诊断筛查；神经母细胞瘤及相关肿瘤诊断及复查；评价自主神经功能障碍、自主神经功能衰竭、自主神经功能病变。临床研究发现检测生物样本中的CAs水平不仅对于嗜铬细胞瘤、副神经节瘤、神经母细胞瘤、高血压、心肌梗塞、肾上腺髓质增生等疾病的诊断和治疗具有重要的临床意义，并且有助于甲状腺功能异常、充血性心力衰竭、糖尿病、肾脏功能不全等疾病的诊断。同时，对于神经电生理等基础医学研究也具有重要的意义。

嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma,PHEOs)或交感神经节(副神经节瘤，paraganglioma,PGLS)的患者血浆或尿液儿茶酚胺水平可能持续或间歇性升高。这会导致间歇性或持续性高血压，以及间歇性的心悸、心律失常、头痛、出汗、苍白、焦虑、震颤和恶心。神经母细胞瘤和相关肿瘤(神经节神经母细胞瘤和神经节神经瘤)患者血浆或尿液中1种或若干儿茶酚胺水平的间歇性或连续升高，偶尔也可出现在其他神经外胚层肿瘤中。遗传或获得性自主功能障碍或自主功能缺失以及自主神经病变的症状特点是在适当的生理刺激下(例如，改变姿势从仰卧到站立，寒冷刺激，运动，压力刺激)1种或几种儿茶酚胺释放量不足。

近年来，国内外检测儿茶酚胺类物质的方法有荧光法、放射免疫法、生物法及高效液相色谱法等。其中荧光法的检测限较高，使得测定时的灵敏度达不到要求；放射免疫法的操作步骤繁琐，价格也比较昂贵，难以在临床上推广普及；生物法的稳定性较差，对样品保存和预处理要求较高而不易实现对临床血药浓度的实时监测。相比于上述几种检测方法，高效液相色谱-串联质谱法因其具有高效、高通量、高灵敏度、高特异性等优点，成为儿茶酚胺及其代谢产物研究的首选方法。LC-MS/MS分析技术针对离子对进行检测，特异性高，能够避免交叉反应的干扰，检测结果更加准确可靠，对开发适用于临床测定儿茶酚胺及其代谢产物的检测具有重要意义。