[发明专利]一种岩藻糖转移酶8(FUT8)功能缺失细胞株的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种岩藻糖转移酶8功能缺失细胞株，其特征在于，所述细胞株表达的岩藻糖转移酶8蛋白序列如SEQ ID NO.2；所述的岩藻糖转移酶8功能缺失细胞株的构建方法，包括以下步骤：

（1）培养细胞株；

（2）混合构建质粒和碱基编辑器，孵育，得到转染试剂；

（3）混合转染试剂和培养细胞株，孵育；

（4）观察细胞，判断转染情况，转染成功即得岩藻糖转移酶功能缺失细胞株；

（5）分选带有荧光的单克隆细胞；

（6）测序检测确定岩藻糖转移酶8功能缺失细胞株；

其中，所述判断转染情况为：观察细胞荧光，如有荧光，则细胞转染成功；

所述质粒中包含用于构建岩藻糖转移酶8功能缺失细胞株的靶向序列和荧光蛋白，所述靶向序列的序列为5’-TGTCAGACGCACTGACAAAG-3’（SEQ ID NO.1）；所述碱基编辑器为腺嘌呤碱基编辑器；

所述细胞株为生产不含有岩藻糖的抗体药物的工程细胞。

2.根据权利要求1所述的细胞株，其特征在于，所述构建质粒的序列如SEQ ID NO.3。

3.根据权利要求1所述的细胞株，其特征在于，所述碱基编辑器包括ABEmax腺嘌呤碱基编辑器。

4.根据权利要求1所述的细胞株，其特征在于，所述测序的引物序列为5’-TCTGTTGATTCCAGGTTCCCA-3’（SEQ ID NO.4）。

5.根据权利要求1所述的细胞株，其特征在于，所述细胞株包括CHO细胞、HEK293细胞。

6.权利要求1～5任一项所述细胞株在制备抗体药物中的应用。