[发明专利]一种具有热稳定性的γ-谷酰胺甲胺合成酶的突变体,其编码基因、氨基酸序列及其应用有效
申请号: | 202110221942.2 | 申请日: | 2021-02-27 |
公开(公告)号: | CN113151199B | 公开(公告)日: | 2023-04-11 |
发明(设计)人: | 齐佳琨;范超;刘军;洪皓;刘明;吴文忠 | 申请(专利权)人: | 大连医诺生物股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/00 | 分类号: | C12N9/00;C12N15/52;C12P13/04 |
代理公司: | 大连格智知识产权代理有限公司 21238 | 代理人: | 刘晓琴 |
地址: | 116600 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 热稳定性 谷酰胺甲胺 合成 突变体 编码 基因 氨基酸 序列 及其 应用 | ||
1.一种具有热稳定性的γ-谷酰胺甲胺合成酶突变体,其特征在于:编码所述突变体的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.如权利要求1所述的γ-谷酰胺甲胺合成酶突变体在生产茶氨酸中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述应用包括将权利要求1所述的γ-谷酰胺甲胺合成酶突变体的全细胞用于茶氨酸生产的催化体系中进行反应;所述茶氨酸生产的催化体系包括300~600mM谷氨酸钠或谷氨酸,350~600mM乙胺或乙胺盐酸盐,120~180mM含镁离子的盐,1~5mMATP或ADP,100~200mM多聚磷酸盐,还添加30~50g/L的能够以ADP为底物进行ATP循环再生的菌体。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述茶氨酸生产的催化体系温度40~55℃,反应pH6~9。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述茶氨酸生产的催化体系中,权利要求1所述的γ-谷酰胺甲胺合成酶突变体的全细胞的浓度为40~70g/L。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述含镁离子的盐选自氯化镁或硫酸镁;所述多聚磷酸盐选自六偏磷酸钠或三聚磷酸钠。
7.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述谷氨酸钠或谷氨酸的浓度为350~450mM;所述乙胺或乙胺盐酸盐的浓度为420~450mM;所述含镁离子的盐浓度为140~160mM;所述ATP或ADP的浓度为2mM;所述多聚磷酸盐浓度为160~180mM。
8.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述的能够以ADP为底物进行ATP循环再生的菌体的浓度为35~45g/L;所述体系温度45~50℃;所述的反应pH6.5~7.5。
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