[发明专利]抑制剂KN-93抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒体外感染的方法及应用有效
| 申请号： | 202110220472.8 | 申请日： | 2021-02-26 |
| 公开（公告）号： | CN112933066B | 公开（公告）日： | 2023-05-02 |
| 发明（设计）人： | 张改平;李睿;郑信贤;乔松林;邢广旭;陈鑫鑫;郭振华;赵东;李学伍 | 申请（专利权）人： | 河南省农业科学院 |
| 主分类号： | A61K31/18 | 分类号： | A61K31/18;A61P31/14;A61P11/00;A61P15/00;C12N5/071;C12N5/0786;C12Q1/18;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 郑州市华翔专利代理事务所(普通合伙) 41122 | 代理人： | 张爱军 |
| 地址： | 450002 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抑制剂 kn 93 抑制 繁殖 呼吸 综合征 病毒 体外 感染 方法 应用 | ||
1.一种钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN-93在制备抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的药物中的应用。
2.如权利要求1所述的抑制剂KN-93在制备抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的RNA含量的药物中的应用。
3.如权利要求1所述的抑制剂KN-93在制备抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的病毒滴度的药物中的应用。
4.如权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于，抑制剂KN-93的浓度为50μmol/L。
5.一种钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN-93抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒体外感染的方法，其特征在于，具体步骤为：
(1)将MARC-145细胞按2.5×105个/mL铺设24孔细胞培养板，每孔加入500μL DMEM培养基，于37℃、5％CO2培养箱中培养12h；
(2)更换新的DMEM培养基，以病毒感染复数为1的PRRSV-2BJ-4毒株于37℃孵育MARC-145细胞3h；弃细胞上清，用PBS缓冲液洗细胞三次，洗去未侵入细胞的病毒粒子；
(3)向细胞培养板孔中加入含50μmol/L KN-93的500μL DMEM培养基，于37℃继续培养9h或45h。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述DMEM培养基含10％(v/v)热灭活胎牛血清、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素。
7.一种钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN-93抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒体外感染的方法，其特征在于，具体步骤为：
(1)将CRL2843-CD163细胞按2.5×105个/mL铺设24孔细胞培养板，每孔加入500μLRPMI1640培养基，于37℃、5％CO2培养箱中培养12h；
(2)更换新的RPMI 1640培养基，以病毒感染复数为1的PRRSV-2BJ-4毒株于37℃孵育CRL2843-CD163细胞3h；弃细胞上清，用PBS缓冲液洗细胞三次，洗去未侵入细胞的病毒粒子；
(3)向细胞培养板孔中加入含50μmol/LKN-93的500μL RPMI 1640培养基，37℃继续培养9h。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述RPMI 1640培养基含10％(v/v)热灭活胎牛血清、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素。
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