[发明专利]一种人肝素结合蛋白免疫比浊检测试剂及其用途

说明书

本申请的实施例公开了一种用于检测样品中肝素结合蛋白的试剂盒。所述试剂盒包括：用于预处理样品的预处理试剂和用于识别肝素结合蛋白的识别试剂，所述预处理试剂包括溶血剂和电解质，其中，所述溶血剂是浓度为1‑3mg/mL的TritonX‑100，所述电解质是浓度为30‑60mg/mL的氯化钠，并且所述预处理试剂的pH值为5.5‑6.5。所述试剂盒可使用全血样品检测肝素结合蛋白浓度，检测所需的采血量少，检测时间短。本申请的实施例还公开了此类试剂盒在定量检测肝素结合蛋白中的用途以及方法。

技术领域

本说明书涉及免疫测定领域，特别涉及一种人肝素结合蛋白免疫比浊检测试剂及其用途。

背景技术

肝素结合蛋白(heparin-binding protein，HBP)又被称为CAP37或天青杀素,是中性粒细胞受到外界刺激释放产生的功能多样的颗粒蛋白。HBP可激活单核细胞和巨噬细胞，具有显著的抗菌活性、趋化特性、促使血管渗漏,使其成为新兴的感染性疾病相关生物标志物。一旦出现细菌性感染时，感染相关M蛋白与纤维蛋白原相结合，致使多行核白细胞被激活，引起大量HBP分泌。HBP广泛用于临床感染性疾病的诊断和鉴别诊断中在脓毒症患者的早期诊断和疗效监测中优势尤为明显,在尿路感染、细菌性脑膜炎、肺部感染等其他感染性疾病中也有一定应用。

目前，国内外已有的肝素结合蛋白免疫比浊法测定试剂盒多适用于体外定量测定血清样本和血浆样本中肝素结合蛋白含量。为获得血清或血浆样本，需要采集的静脉血量较大，且采血后需要检验人员对全血样本进行预处理，不能直接进行检测，这使得分析仪器无法依托现有试剂盒进行全自动的分析测定，且整套检测流程耗时较长。

发明内容

根据本申请的一方面，提供一种用于检测样品中肝素结合蛋白的试剂盒，所述试剂盒包括：用于预处理样品的预处理试剂和用于识别肝素结合蛋白的识别试剂，所述预处理试剂包括溶血剂和电解质，其中，所述溶血剂是浓度为1-3mg/mL的TritonX-100，所述电解质是浓度为30-60mg/mL的氯化钠，并且所述预处理试剂的pH值为5.5-6.5。

在一些实施例中，所述TritonX-100的浓度为2mg/mL。

在一些实施例中，所述氯化钠的浓度为40mg/mL。

在一些实施例中，所述样品为全血。

在一些实施例中，所述样品为血清或血浆。

在一些实施例中，所述预处理试剂还含有缓冲试剂，所述缓冲试剂选自磷酸、2-(N-吗啉代)乙磺酸、磷酸氢二钠-柠檬酸、哌嗪-1,4-二乙磺酸中的一种或几种的组合。

在一些实施例中，所述缓冲试剂的浓度为5-100mmol/L。

在一些实施例中，所述预处理试剂还包括加速剂聚乙二醇6000，其中聚乙二醇6000的浓度为10-50mg/mL。

在一些实施例中，所述预处理试剂还包括防腐剂Proclin300，其中Proclin300的浓度为0.2-0.4mg/mL。

在一些实施例中，所述用于识别肝素结合蛋白的识别试剂包括偶联有肝素结合蛋白抗体或其抗原结合片段的乳胶微球。

在一些实施例中，所述人肝素结合蛋白抗体或其抗原结合片段在交联缓冲液中通过化学交联剂偶联至乳胶微球表面；其中，所述化学交联剂选自1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺、碳化亚胺、酰肼、异氰酸钾中的一种或多种的组合；所述交联缓冲液为不含氨基的缓冲液。

在一些实施例中，所述交联缓冲液选自2-(N-吗啉代)乙磺酸、磷酸、N-(2-羟乙基)哌嚓-N/-(2-乙磺酸)、3-(N-吗啉代)-2-羟基丙磺酸中的一种或多种的组合。

在一些实施例中，所述交联缓冲液的pH值范围为6.0-8.0。