[发明专利]一种特异识别整合素β3亚基蛋白的核酸适体及其应用在审
| 申请号: | 202110212754.3 | 申请日: | 2021-02-25 |
| 公开(公告)号: | CN112877333A | 公开(公告)日: | 2021-06-01 |
| 发明(设计)人: | 杜玉珍;滕小艳;汪俊彦;魏丽荣;胡刘平 | 申请(专利权)人: | 上海市第六人民医院 |
| 主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;G01N33/68 |
| 代理公司: | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人: | 郎祺 |
| 地址: | 200233 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 特异 识别 整合 蛋白 核酸 及其 应用 | ||
1.一种特异识别整合素β3亚基蛋白的核酸适体,其特征在于,所述核酸适体选自如SEQID NO.1-10所示的序列;或选自如SEQ ID NO.1-10所示序列经标记修饰后的序列;或选自如SEQ ID NO.1-10所示序列经取代、缺失或添加若干核苷酸后的序列。
2.根据权利要求1所述的核酸适体,其特征在于,将所合成的整合素β3亚基蛋白的核酸适体随机DNA文库,依次采用整合素β3亚基纯蛋白筛选、采用整合素β3高表达细胞NCI-H460正筛选、采用整合素β3不表达细胞Hela负筛选,即得如SEQ ID NO.1-10所示的序列。
3.根据权利要求1所述的核酸适体,其特征在于,所述标记修饰选自荧光标记、放射性标记、治疗性标记、生物素标记或酶标记。
4.根据权利要求3所述的核酸适体,其特征在于,所述标记修饰为荧光标记。
5.一种采用如权利要求1-4任一项所述核酸适体特异识别整合素β3亚基蛋白的方法,其特征在于,将分散于结合缓冲液中的待测细胞样品与所述核酸适体摇床孵育,孵育完成后采用洗涤缓冲液离心清洗,清洗完成后通过流式细胞仪检测即可。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述结合缓冲液包括:0.45%的葡萄糖,5mM的氯化镁,100mg/L的tRNA和1g/L的BSA。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述洗涤缓冲液包括:0.45%的葡萄糖和5mM的氯化镁。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述检测为荧光检测。
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